碱性缓冲液法

相关实验：Southern 印迹实验

最新修订时间：2024-05-13

原理

用带正电荷的尼龙膜时，如果用碱性转移缓冲液，则转移的DNA可共价结合于膜上。

材料与仪器

实验材料	DNA
试剂、试剂盒	NaOH NaCl
仪器、耗材	电泳仪

步骤

1. 印迹法中步骤1和歩骤2中所述准备凝胶及用0.25 mol/l HCl处理。

2. 用蒸馏水漂洗凝胶，并用10倍体积的0.4 mol/l NaOH变性，缓慢摇动20 min。

3. 用0.4 mol/l NaOH替代20xSSC作为转移液进行转印。转印时间≥2 h。

4. 取出膜，用2xSSC漂洗，置于一张Whatman 3 MM 滤纸上晾干，保存于室温。

来源：丁香实验

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