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        放射免疫测定

        相关实验:胰岛素测定实验

        最新修订时间:

        原理

        胰岛素的分子量5700,由两条氨基酸肽链组成。A链有21个 氨基酸,B链有30个氨基酸。A-B链之间有两处二硫键相连。胰岛B细胞中储备胰岛素约200U,每天分泌约40U。空腹时,血浆胰岛素浓度是5~15μU/mL。进餐后血浆胰岛素水平可增加5~10倍。胰岛素的生物合成速度受血浆葡萄糖浓度的影响,当血糖浓度升高时,B细胞中胰岛素原含量增加,胰岛素合成加速。胰岛素是与C肽以相等分子分泌进入血液的。

        材料与仪器

        步骤


        1.  按表进行。
        放射免疫测定

        2.  测定和计算反应完毕后,将各管于室温3 000 r/ min离心30min,仔细吸取上清液,收集于放射性废液贮存容器内。用-计数仪分别测量各管沉淀物(B)的放射性强度(cpm),以两管的cpm均值表示。再以第1,2管的cpm值为Bo,分别计算结合率(B%,即B/Bo×100%),用B%为纵坐标,不同浓度胰岛素标准品为横坐标,绘制标准曲线。然后根据待检管的B%,从标准曲线中即可查得胰岛素的相应含量。

        注意事项

        临床上使用胰岛素治疗的病人,血清中存在胰岛素抗体,影响放射免疫方法测定血胰岛素水平,在这种情况下可通过测定血浆C肽水平,来了解内源性胰岛素分泌状态。

        常见问题

        1.空腹时正常值为5~15mU/L,胰岛素依赖型则低于正常的下限或测不出,非胰岛素依赖型在正常范围或高于正常人。
        2.胰岛素释放试验:胰岛素依赖型无高峰出现,呈低平曲线;非胰岛素依赖型高峰较正常为低,或高峰延迟。 

        来源:丁香实验

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