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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负80度
- 保质期:
3年
- 英文名:
pUC35s-mCherry,发光正常
- 库存:
100
- 供应商:
上海柯雷生物
- 规格:
20ul
详细请登录网站查询 www.kelei-biology.com.或发邮件至1722105945@qq.com,(QQ:1722105945)我们会第一时间给您回复。
柯雷生物拥有数万种质粒,菌种,基因,细胞株,试剂盒等科研资源,还提供基因合成,质粒改造,载体构建和蛋白表达等精品实验服务
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文献和实验wliangl 求助各位达人,谁能帮忙分析一下这个问题: 使用mCherry质粒(红色荧光质粒)在24孔板转染血管内皮细胞。三天后使用Nikon的荧光显微镜,Texas Red滤镜系统观察:阴性对照(未进行转染,直接培养)和转染细胞同时出现红色荧光,强度相当,转染组全部细胞都出现红色荧光,对照组部分细胞出现,部分细胞较弱,目测感觉全都不像红色荧光表达。 问题排除: 1. 使用其他滤镜系统没有荧光(GFP,DAPI,CY5)
表达His和sumo标签蛋白 pET28a+EGFP 大肠杆菌质粒 Kan 绿色荧光原核载体,0.1mM TPTG,20度诱导过夜 pET28a+DsRed2 大肠杆菌质粒 Kan 红色荧光原核载体,0.1mM TPTG,20度诱导过夜 pET28a+EYFP
?是我们要特别注意的。 复制子:通常表达载体都会选用高拷贝的复制子。pSC101类质粒是严谨方式复制,拷贝数低,pCoE1,pMBI(pUC)类的复制子的拷贝数高达500以上,是表达载体常用的。通常情况下质粒拷贝数和表达量是非线性的正相关,当然也不是越多越好,超过细胞的承受范围反而会损害细胞的生长。如果碰巧需要2个质粒共转化,就要考虑复制元是否相容的问题。 筛选标记和报告基因:氨苄青霉素抗性是最常见的筛选标记,卡那霉素或者是新霉素次之,通常是另一个载体的筛选标记用。四环素,红霉素和氯
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