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        放射免疫测定胰岛素

        互联网

        1415

         

        一、材料及试剂

        1、胰岛素标准品(不同浓度的)

        2、125 I-胰岛素

        3、抗血清

        4、第二抗体

        5、分析试剂  为0.05 Mol/L pH7.4 PBS液+1%正常兔血清。

        6、计数仪

        7、试管、加样器、离心机等

        二、操作方法

        1、按表进行。

        2、测定和计算反应完毕后,将各管于室温3 000 r/ min离心30min,仔细吸取上清液,收集于放射性废液贮存容器内。用-计数仪分别测量各管沉淀物(B)的放射性强度(cpm),以两管的cpm均值表示。再以第1,2管的cpm值为Bo,分别计算结合率(B%,即B/Bo×100%),用B%为纵坐标,不同浓度胰岛素标准品为横坐标,绘制标准曲线。然后根据待检管的B%,从标准曲线中即可查得胰岛素的相应含量。

         

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