基于猫免疫缺陷病毒的慢病毒载体的生产和使用

实验分类：

其他实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

基于猫免疫缺陷病毒（F IV ) 的慢病毒载体对于介导整合的转基因到非分裂的人体细胞是非常有用的。本章主要描述了生产和使用新一代F I V 载体的方法，讨论了 F IV和其他慢病毒载体相比较的关键特征，并提供了大规模/小规模载体生产的详细方案。此外，最近鉴定的种属特异的反转录病毒限制因素的实际应用和非整合的F I V 载体的生成也是本章讨论的主题
作者：T.弗里德曼等,译者：殷勤伟等，本实验来自「基因转移」

来源：丁香实验

操作方法

基于猫免疫缺陷病毒的慢病毒载体的生产和使用

用生长在CFlO或者是CF2 设备中的细胞生产载体材料试剂转染细胞系： 293T 早期的 293T 细胞比较好。它们可以在种植转染前持续均一地分裂。 DMEM加 1 0 % 胎牛血清（DMEM-10)、 lOO^/ml 青霉素、 lOOug/ml 链霉素以及2mmol/L L-谷氨酸质粒 DNA: pMD.G、 pFP