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云舟生物科技(广州)有限公司
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3个shRNA慢病毒载体构建服务套装
3个shRNA慢病毒载体构建服务套装
交付内容: 3个载体,甘油菌
-pLV[shRNA]-EGFP:T2A:Puro-U6>hAHNAK2[shRNA#1](载体ID:VB190327-1327prb)
-pLV[shRNA]-EGFP:T2A:Puro-U6>hAHNAK2[shRNA#2](载体ID:VB190327-1329uuc)
-pLV[shRNA]-EGFP:T2A:Puro-U6>hAHNAK2[shRNA#3](载体ID:VB190327-1332cdv)
预计周期: 7-14 天
克隆菌株: Stbl3 (或其他适用菌株)
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文献和实验angel880627 最近因课题需要,要构建基因沉默的小鼠模型来进行试验,有木有大侠知道得到慢病毒载体后该如何构建小鼠模型?文献里写的都很模糊,实验室里有没有师兄师姐做过,还望有经验的大虾能给点指导,越具体约好啊~~~ majilee 你说得也很模糊 1.是要小鼠体细胞都沉默的话 需要从es细胞开始 2.另外一种是中国人很常见很经常做的 慢病毒包装好后注射老鼠 angel880627
目前慢病毒载体主要应用在以下几个方面: 细胞基因治疗(截止目前,已上市的 CAR-T 产品有 9 款采用了慢病毒载体递送 CAR 基因) 基因表达调控(过表达、RNA 干扰研究等) 基因编辑(CRlSPR/Cas9 gRNA 文库筛选、基因敲除、敲入、点突变、基因激活/抑制) 稳转细胞株构建 活体细胞成像追踪 转基因动物 图 1 慢病毒载体的主要应用方向 应用案例 案例 1:用慢病毒载体进行基因过表达,构建稳转细胞株,研究葡萄糖激酶在前列腺癌(PCa)中的作用[1] 细胞
感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达。 (2)服务流程 1)含目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和纯化提取; 2)慢病毒干扰载体、pGag/Pol、pRev、pVSV-G四质粒共转染293T细胞; 3)培养48~72h,收集培养上清; 4)病毒的纯化和浓缩(超离和/或超滤); 5)滴度测定、目的基因检定 6)将制得的慢病毒液转导客户的靶细胞,筛选混合稳定细胞株,并检测靶基因的表达。 客户提供 1)表达miRNA/shRNA的质粒(提供测序图谱)或所要
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