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        大鼠失血性休克法

        相关实验:休克实验

        最新修订时间:

        简介

        大鼠失血性休克法是教学中用于研究休克的常见的休克动物模型。

        原理

        大鼠失血性休克法的基本原理是采用对大鼠股动脉处快速放血的方法复制失血性休克的动物模型,利用解剖显微镜动态观察肠系膜微循环血流动力学的改变;依达拉奉是一种自由基清除剂,能抑制黄嘌呤氧化酶和次黄嘌呤氧化酶的活性,通过尾静脉注射依达拉奉进行治疗,观察其对大鼠失血性休克的治疗作用。

        用途

        大鼠失血性休克法可用于探讨失血性休克的发病机理、观察依达拉奉对大鼠失血性休克的疗效并探讨其机制。

        材料与仪器

        器材:

        大鼠手术器械1套,大鼠板,BL-420生物信号采集分析系统

        压力传感器,三通阀,微循环观察装置(解剖显微镜、灌流盒)

        静脉输液装置,储血瓶,动脉导管和静脉导管,动脉夹,温度计

        100 mL烧杯,1 mL、5 mL注射器,止血纱布,电子秤。


        试剂:


        ①3% 戊巴比妥钠溶液;
        ②生理盐水;
        ③微循环灌流液(含1% 明胶的台氏液);
        ④0.3% 肝素钠生理盐水溶液;
        ⑤依达拉奉。

        步骤

        大鼠失血性休克法的基本过程可分为如下几步:


        A. 取雄性SD大鼠一只称重后,给予3% 戊巴比妥钠按1 mL/kg剂量腹腔内注射麻醉。


        B. 将大鼠仰卧固定于大鼠板上,剪去手术区被毛,在甲状软骨下做颈部正中切口(长约2 cm),分离气管,做倒“T”形切口,插入“Y”形气管插管并固定,保证呼吸通畅,并将插管的一侧接呼吸描记装置,描记呼吸;分离一侧颈总动脉,插入动脉导管,经压力传感器(插管前在动脉导管和压力传感器导管部分充盈肝素,以防止凝血后堵塞血压传导通路)与BL-420生物信号采集与分析系统相连,记录MAP、Ps-d、HR。


        C. 在左侧股三角区域触及股动脉后,沿动脉行走方向做长约1 cm切口,游离左股动脉后插入含肝素聚乙烯导管,在其尖端之前用动脉夹股动脉,导管另一端与含0.5 mL肝素钠盐水的注射器相连,以备放血。


        D. 在剑突下方1 cm处向下沿正中线做长约2 cm的腹正中切口,沿腹白线打开腹腔,找出一段游离度较大的小肠肠袢,轻轻拉出,置于微循环灌流盒内,用解剖显微镜观察肠系膜微循环情况。


        E. 将温度计插入直肠,测体温。


        F. 记录各项指标后,通过含0.5 mL肝素钠盐水的注射器抽取血液(0.6 mL/min)直到平均动脉压降到40 mmHg,必要时根据情况抽取更多的血液或回输部分血液使动脉压维持在40 mmHg水平,持续60 min,记录各项指标及储血瓶内血量。


        G. 停止放血,从尾静脉注入依达拉奉药液3 mg/kg(2 mL/kg)(生理盐水治疗组则输入生理盐水2 mL/kg),注入完后记录治疗后5、15、30、60 min时的各项指标。

        注意事项

        (1)麻醉深浅要适度,过深可严重抑制呼吸;过浅则动物疼痛挣扎,影响观察,甚至引起神经源性休克。
        (2)牵拉肠袢动作要轻柔,以免引起严重低血压,影响休克实验。
        (3)尽量减少手术出血,分离血管时,应钝性分离,切勿使用手术刀或手术剪;出血时应设法止血。
        (4)所有动、静脉导管及压力传感器内均应充盈肝素生理盐水,并排尽气泡。
        (5)压力传感器高度均应与心脏水平一致。
        (6)观察微循环时,分清动脉、静脉及毛细血管,选好标志血管,固定视野,以保持前后观察结果一致。

        来源:丁香实验

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