
GenFQ SYBR qPCR Master Mix
- ¥580
- 济凡
- A104-01 A104-02
- 常州
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
24个月
- 保存条件:
-20保存
- 规格:
20 μl×500 rxn
本试剂是采用SYBR Green I 嵌合荧光法进行的Real Time PCR专用试剂,组份中含有Real Time PCR反应中合适浓度的 SYBR Green I,是一种2×浓度的预混试剂,实验进行时,PCR反应液配制十分简单。试剂中使用了抗Taq抗体的Hot Start法用的DNA聚合酶,与优化的PCR Buffer组合,可以有效的抑制非特异扩增,提高PCR扩增效率,在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对靶基因进行准确定量、检测,重复性好,可信度高。
产品优势
◈ 可以快速、准确地对目的基因进行检测、定量。
◈ 在2×浓度的 qPCR mix中,预先混有SYBR Green I,配制PCR反应液时,只需加入模板、引物、灭菌水即可,操作简单方便。
◈ 使用抗Taq抗体修饰的Taq DNA聚合酶,可以进行Hot Start 法PCR反应,配合优化的Buffer系统,扩增效率高,灵敏度高。
储存条件
避光保存, -20℃ 保质期2年,如果经常使用,可解冻后于4℃ 保存至少3个月。
规格
| 目录号 | A104-01 | A104-02 |
| 规格 | 20 μl ×125 rxns | 20 μl ×500 rxns |
| 目录价 | ¥ 580 | ¥ 1980 |
实验案例
1. 灵敏度检测
以玉米cDNA为模板进行11个2倍浓度梯度稀释,使用GenFQ SYBR qPCR Master Mix进行扩增,结果显示,在宽广的模板浓度范围内具有良好的线性关系,可检测低拷贝模板,灵敏度高。
2. 重复性检测
以稀释后的玉米cDNA为模板,使用GenFQ SYBR qPCR Master Mix进行扩增,做10个重复,结果如下,扩增效率高,重复性好。
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文献和实验几个复孔,选择重复性好的 CT 值参与计算。 (2)CT<30,重复性较差。这种情况一般同操作有关。 解决办法:从以下几个方面进行问题的排查:①加样准确度;②移液器吸取液体的准确度;③定期校准 qPCR 仪。 ①加样准确度 避免小体积加样,减少加样误差。可以将引物、SYBR Green Mix、ddH2O 配置成混合体系,并且增加模板的稀释梯度,大体积加样。如:原液 cDNA 添加 1μl,可以更改为原液 cDNA 稀释 5 倍,添加 5μl,使用 ddH2O 补齐体系至 20μl 即可
成功做完了逆转录,这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多,即使使用了 qPCR 预混液,也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列(Q411 /Q421 /Q431 /Q441)提供不同颜色的试剂,利用移液过程中的变色效应,追踪移液过程,可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时,引物设计需遵循以下原则:引物长度 18~25bp,产物长度 80~300bp,GC 含量 40~60
PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡,校正加样误差或者是孔与孔之间的误差,提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系,也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲,real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样,要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间,所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法,最好在PCR扩增程序结束










