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类黄酮糖基转移酶(UFGT)测试盒

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  • XK-SJH-A840
  • 国产
  • 2025年07月15日
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      100

    • 英文名

      Flavonoid glycosyltransferase (UFGT) test kit

    • CAS号

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      100管/96样

    产品细节图片1
    类黄酮糖基转移酶(UDP-glycose flavonoid glycosyltransferase, UFGT) 试剂盒说明书

    微量法 100 /96

    正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:

    花色苷是一类易溶于极性溶剂的天然色素,属黄酮类化合物。花色苷广泛存在于植物的根、茎、叶、花和果实中,使其呈现由红到紫等不同颜色,是植物主要的呈色物质。
    类黄酮糖基转移酶UDP-glycose flavonoid glycosyltransferase, UFGT是花色苷合成过程的最后一个酶,可以把不稳定的花色素催化成花色苷,在一定范围内,UFGT活性与花色素苷的合成呈现正相关。

    测定原理:

    UFGT 催化UDPG 与槲皮素生成 UDPUDP 在bing酮酸激酶与乳酸脱氢酶作用下,氧化 NADHNAD+NAD+生成速度与 UDP 含量成正比,通过 340nm 吸光度下降速度反映 UFGT 活性。

    需自备的仪器和用品:

    酶标仪、水浴锅、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

    试剂的组成和配制:

    提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
    试剂一:粉剂×1 瓶,-20℃避光保存;临用前加入 20mL 试剂四溶解。试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;
    试剂三:液体 100μL×1 管,4℃避光保存; 试剂四:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;

    样品测定的准备:

    按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL
    提取液,冰浴中匀浆。10000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

    测定步骤

    1、在EP 管中加入如下试剂
     
    试剂名称(μL 测定管
    样本 20
    试剂一 180
    混匀,30℃反应 4h95℃水浴 5min 灭活,冷却至室温。10000g 4℃离心 5min,取反应液待测。
    2、工作液配制:在试剂二中加入 20mL 试剂四溶解,再加入 20μL 试剂三,混匀待用。用不完的工作液分装后-20℃保存一个月,禁止反复冻融。
    3、在 96 孔板中加入如下试剂
    反应液 20
    工作液 180
    混匀,测定 340nm 1min 时吸光值 A1 6min 时吸光值 A2ΔA=A1-A2

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    产品细节图片2产品细节图片3
     
     

    UFGT 活力计算:

    1、按照蛋白浓度计算
    单位的定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化 1nmol NADH 定义为一个酶活力单位。
    UFGT 活力(nmol/min/mg prot)=ΔA×V 反总÷ε×d×109÷V ×Cpr÷T×10
    =134×ΔA ÷Cpr
    2、按样本鲜重计算
    单位的定义:每 g 组织每分钟催化 1nmol NADH 定义为一个酶活力单位。
    UFGT 活力(nmol/min/g 鲜重)=ΔA×V 反总÷ε×d×109÷W× V ÷V 样总÷T×10
    =134×ΔA÷W
    V 反总:反应体系总体积,0.2mLεNADPH 摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cmd96 孔板光径,0.5cmV 样:加入样本体积,0.02 mLV 样总:加入提取液体积,1 mLT反应时间,240 min10,稀释倍数;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本质量;
    产品细节图片4

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