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文献和实验于细胞阳选,也能用于细胞阴选中。 为了评估 Strep-Tactin®TACS 琼脂糖柱细胞阴选的效率,实验从外周血单个核细胞(PBMC)样品中富集了 CD3- CD56+自然杀伤细胞(NK)。材料为Strep-Tactin®TACS 琼脂糖柱以及生物素化的抗体,仅 10 分钟,便完成了细胞阴选(图 1)。 流程如下: 阴选流程:生物素化抗体与 PBMC 孵育标记非目的细胞,加入至亲和层析柱后,即可收集目的细胞 实验方案 CD3- CD56+ NK 的细胞阴选 · 将 1 x
1 ml 2.4 中准备好的 Biotin Elution Buffer,让液流完全进入胶体后孵育 2 min,加入 9 ml 的 Biotin Elution Buffer; 1.13 对于从全血中分选目的细胞,再加入 10 ml 的 Biotin Elution Buffer; 1.14 300 g 转速离心 10 分钟,收集洗脱目的细胞。 流程图: 2. 实验数据 以下流式图为从 7.5 ml 全血中,选出 CD3 + T 细胞的数据。选后细胞以 CD3 -APC (OKT
受体多价结合,来传递激活信号。该方法最大的优势是在刺激过程中,能够通过加入 biotin 移除刺激试剂,达到精确掌控活化时间的目的。 2、实验步骤 小鼠脾脏淋巴细胞的分离与上面抗体法中步骤相同,当然,也可以选择用分选试剂盒进一步分选得到 T 淋巴细胞进行刺激。(注:如果选择提前富集T淋巴细胞,建议使用阴选试剂盒或可以去除分选试剂的阳选试剂盒) 1. 将 CD3 Fab-Strep、CD28 Fab-Strep、Strep-Tactin® Multimer 按照 1:1:1 的比例进行混合,4°
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