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维生素E生化试剂盒

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  • XK-SJH-A759
  • 国产
  • 2025年07月11日
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      100

    • 英文名

      Vitamin E test kit

    • CAS号

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8°C

    • 规格

      50管/24样

    产品细节图片1

    维生素 EVitamin EVE)试剂盒说明书

    光度法    50 /24 :正式测定前选择 2-3 个预差异大的样做预测定。

    测定意义
    维生素 EVitamin E)是一种脂溶性维生素,其水解产物为生育酚,是生物体中最主要的抗
    氧化剂之一,能阻止不饱和脂肪酸收到过氧化作用的损伤,维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能,具有延缓衰老、预防溶血性贫血作用,在医药、化妆品、保健品、食品行业具有较高的应用价值。

    测定原理

    VE 还原 Fe3+Fe2+Fe2+1,10-菲罗啉产生有色络合物,在 530nm 有特征吸收峰。

    自备实验用品及仪器

    天平、研钵、离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、漩涡震荡仪。

    试剂组成和配制

    提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
    试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂二:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。
    试剂三:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。试剂四:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。

    样本处理

    1.    组织:按照质量g:提取液体积(mL)15~10 的比例建议称取约 0.2g,加入 1mL
    提取液)加入提取液,充分匀浆后用提取液定至 2mL,在漩涡混匀仪上震荡 5min,于255000g 离心 10min,取上层测定。
    2.    细胞:按照细胞数量104 :提取液体积mL)为 500~10001 的比例建议 1000万细胞加入 2mL 提取液,冰浴超声波破碎细胞功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min;在漩涡混匀仪上震荡 5min,于 25℃,5000g 离心 10min,取上层测定。
    3. 血清:取 0.2mL,加 1.9mL 提取液,漩涡仪混匀上震荡 5min,于 255000g 离心 10min取上层测定。

      对照管 测定管
    样品(μL 500 500
    试剂一(μL 100 100
    试剂二(μL   100
    试剂三(μL 100  
    充分混匀,25反应 5min
    试剂四(μL 300 300
    充分混匀,于 1mL 玻璃比色皿,无水乙醇调零,测定 530nm 处吸光值,记为 A
    对照管和 A 测定管,△A=A 测定管-A 对照管。
     
    测定操作


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    计算公式
    标准曲线:y = 0.022x + 0.0065R2 = 0.9978
    1. 按照蛋白含量计算
    VE 含量(μg/mg prot=(△A -0.0065÷ 0.022×V 反总÷V ×Cpr
    = 181.8×(△A -0.0065÷ Cpr
     
    1. 按照样本质量计算
    VE 含量(μg/g 鲜重)=(△A -0.0065÷ 0.022×V 反总÷V ×W÷V 样总)
    = 181.8×(△A -0.0065÷ W
    1. 按照细胞数量计算
    VE 含量(μg/104 cell=(△A -0.0065÷ 0.022×V 反总÷V ×细胞数量÷V 样总)
    = 181.8×(△A -0.0065÷ 细胞数量
    1. 按照液体体积计算
    VE 含量(μg/mL=(△A -0.0065÷ 0.022×V 反总÷V ×20
    = 1818×(△A -0.0065
    V 反总:反应总体积,1mL;:V 样:加入样本体积,0.5mLV 样总:加入提取液体积,2mL
    Cpr:蛋白浓度,mg/mLW:样本质量,g

    注意事项

    1. 若反应体系产生沉淀,需要将样品进行适当的稀释,并在计算公式中乘以稀释倍数。
    2. 最低检出限为 29.5μg/g
    产品细节图片4

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