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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Tyrosine Ammonia Lyase (TAL) Test Kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/24样
酪氨酸解氨酶(Tyrosine ammonilyase,TAL)试剂盒说明书
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
TAL 广泛存在于植物和微生物中,是苯丙氨酸代谢途径的关键酶之一。TAL 能够跃过肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)直接将酪氨酸转化为香豆酸,香豆酸可进一步生成白藜芦醇、柚皮素等具有抗氧化、抗衰老作用的苯丙素类天然产物。
测定原理:
TAL 能够分解酪氨酸产生香豆酸,使反应溶液 333nm 下的吸光度随反应时间而上升,根据吸光度的变化率可计算出TAL 活性。需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水试剂组成和配制:
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存; 试剂一:液体 60mL×1 瓶,4℃保存; 试剂二:粉剂×2 瓶,4℃保存;试剂三:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
粗酶液提取:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量
(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)果汁等液体样品:直接检测。
相关图片:

测定步骤:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 333nm,蒸馏水调零。2、试剂二的配置:临用前在试剂二瓶中加入 15mL 试剂一充分溶解待用(用不完的试剂 4℃ 保存一周,注意现配现用),在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。 3、在EP 管中依次加入如下试剂
| 试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 |
| 样本上清 | 100 | 100 |
| 试剂一 | 900 | |
| 试剂二 | 900 | |
| 充分混匀,40℃保温 60min | ||
| 试剂三 | 50 | 50 |
测定与A 对照,ΔA=A 测定-A 对照
TAL 活性计算:
1、血清(浆)或果汁 TAL 活性
0.01 为一个酶活力单位。
TAL(U/mL)=ΔA×V 反总÷( V 样÷V 样总)÷0.01÷T =17.5×ΔA
2、组织、细菌或细胞 TAL 活性
- 按样本蛋白浓度计算:
TAL(U/mg prot)=ΔA×V 反总÷(V 样×Cpr )÷0.01÷T =17.5×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
- 按样本鲜重计算:
TAL(U/g 鲜重)=ΔA×V 反总÷(W× V 样÷V 样总)÷0.01÷T =17.5×ΔA÷W
- 按细菌或细胞密度计算:
TAL(U/104 cell)=ΔA×V 反总÷( 500×V 样÷V 样总)÷0.01÷T =0.035×ΔA
V 反总:反应体系总体积,1.05mL;V 样:加入样本体积,0.1mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,60 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500: 细胞或细菌总数,500 万。
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文献和实验1、FGFR2、FGFR3以及FGF4。它们的特点是在胞膜外含有3个免疫球蛋样结构域,其中在第1和第2结构域之间有一个含8个连续的酸性氨基酸结构,又称酸性盒结构域(acid box domain);胞浆内含有两个呈串联结构的酷氨酸激酶功能区。 图8-5 受体型酪氨酸激酶示意图 家体型酪氨酸蛋白激酶所介导的信号传递途径中涉及到一种重要的蛋白激酶即丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK
素的形成,减轻白癜风症状。 3、医药用作甲状腺功能亢进;食品添加剂 。 4、是一种重要的生化试剂,是合成多肽类激素、抗生素、L-多巴等药物的主要原料。 5、广泛用于农业科学研究,也作饮料添加剂和配制人工昆虫饲料。 6、由于酪氨酸有刺激和抗抑郁的作用,早上和午餐前配合服用1000到1500毫克的色氨酸(色氨酸使人平静)那么在晚上它对减轻抑郁会有很好的治疗效果。研究者发现,对于某些人群,色氨酸和酪氨酸一起使用,比酪氨酸或者是色氨酸单独使用,对于减轻抑郁
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xungufeng820 各位大侠: 小弟是新手,师兄们也没做过的,不知western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗?急盼回复!万分感谢! snowxyh 我用过总蛋白提取试剂盒提蛋白,之后western-blot检测NF-KB,但是感觉这样得到的蛋白浓度很稀,需要比较大的上样量才能检测出来,个人感觉,还是用传统的细胞匀浆裂解,离心提取上清,这样得到的蛋白浓度大,做试验结果好











