- ￥460
- Xkbio
- XK-SJH-A716
- 国产
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Laccase kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/24样
漆酶（Laccase）试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义漆酶（CE1.10.3.2）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高
等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。
测定原理
漆酶分解底物 ABTS 产生 ABTS 自由基，在 420nm 处的吸光系数远大于底物 ABTS，测定ABTS 自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。试剂组成和配制
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
工作液：粉剂×1 瓶，4℃避光保存，临用前加 25mL 试剂一溶解；用不完的试剂 4℃保存一周。
酶液提取
1． 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心 30min，取上清，置冰上待测。 2． 细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500
万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。
3． 培养液：直接检测。
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注意：
1、 极少数样本在 60℃水浴 20min 后会出现沉淀，可经过 8000g 25℃离心 10min 后，取上
清检测，例如成熟的水稻叶片样本。
2、 为确保检测准确性，若ΔA 大于 2，将样本用提取液稀释 2~10 倍后重新检测，计算公式乘以相应稀释倍数。
酶活性计算公式
- 按照蛋白浓度计算
DA
- 按照样本质量计算
DA
- 按照细胞数量计算
细胞数量
- 按照液体体积计算
DA
×V 反总÷（V 样×细胞数量÷V 样总）÷T= 9.26×△ A÷
酶活性定义：每升培养液每分钟氧化 1nmol 底物 ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位。
DA
ε：ABTS 毫摩尔消光系数：36L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应总体积， 1mL；V 样：反应中样本体积，0.15mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T：反应时间，20min
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文献和实验1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活，必须了解酶催化反应总的反应式，而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量，使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶
针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律，但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图，如下所示： 延迟区：无规律可寻。 等速区：对应的是速率法，一般应用于酶活力的检测。 过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。 平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
在生化室日常工作中，大家会发现：在双试剂测试项目中，总是R2用完了，而R1尚余很多，随着检验次数的累积， 这种效应越加明显，留下来的R1留之无用， 弃之可惜。 生化试剂R1、R2消耗量不对等的原因： 如果查阅仪器说明书，可以发现生化试剂在使用过程中是有损耗的，这种效应是由于仪器本身设计有试剂 ”取样/ 富余量“所致，多数仪器都存在这种问题。 仪器在试剂瓶转移到反应杯的过程中，会多吸入大概5ul的量
