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- 2026年03月03日
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- 库存：
100
- 英文名：
Soil glutaminase (S-GLS) test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100T
土壤谷氨酰胺酶(solid-glutaminase, S- GLS) 活性测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
GLS（EC 3.5.1.2）存在于高等动物和某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。测定原理：
S-GLS 催化谷氨酰胺水解成 L-谷氨酸和氨，利用奈氏试剂检测氨增加的速率，即可计算其酶活性。需自备仪器和用品：
台式离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、甲苯、冰和双蒸水。试剂组成和配制：
试剂一×1 瓶，8 mL，4 ℃保存； 试剂二×1 瓶，20 mL，4 ℃保存； 试剂三×1 瓶，30 mL，常温保存； 试剂四×1 瓶，10 mL，常温保存； 试剂五×1 瓶，6 mL，常温保存；试剂六×1瓶，6 mL，常温避光保存。
测定步骤：
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 420nm，蒸馏水调零。2、样品测定（在 EP 管中加入下列试剂）：
| 试剂名称（uL） | 测定管 | 对照管 |
| 样本 | 0.1 | |
| 甲苯 | 25 | 25 |
| 振荡混匀，室温放置 15min | ||
| 试剂一 | 100 | 100 |
| 试剂二 | 400 | 400 |
| 试剂三 | 525 | 525 |
| 上清液 | 650 | 650 |
| 试剂四 | 150 | 150 |
| 试剂五 | 100 | 100 |
| 试剂六 | 100 | 100 |
注意：试剂六如出现沉淀，静置后取上清使用。
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酶活性计算：
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0084x -0.005；x 为标准品浓度（μmol/mL），y 为吸光值
A。
单位定义：每 g 土样每 min 催化谷氨酰胺生成 1μmol 氨定义为一个酶活力单位。
S-GLS（μmol/min/g 土样）＝(ΔA+0.005)÷0.0084×V 反总÷W÷T=0.521×(ΔA +0.005)÷W。
V 反总：反应体系总体积：0.525mL；T：反应时间，2h=120min；W：样本质量，g。
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文献和实验物及其鉴定结果富集分析发生变化的代谢通路及推测关键代谢酶；采用免疫组化方法检测锁定的代谢酶表达，进一步验证其与代谢标志物是否具有同样的空间分布特征。 图 | 食管癌组织（癌变与癌旁不同组织）潜在标志物分布特征 研究结论 该研究建立了一种高灵敏的空间分辨的原位代谢组学方法（空间代谢组学），对食管癌潜在原位标志物进行了代谢通路分析，并对通路上相关联代谢物的分布特征进行原位可视化表征，分析其空间变化趋势，发现了并验证了 6 个在食管癌中异常表达的代谢酶：吡咯-5-羧酸还原酶 2(PYCR2)、谷氨酰胺酶
。 负向调控通路 MTF1（金属转录因子1）通过调控金属硫蛋白表达减少游离铜；GLS（谷氨酰胺酶）维持代谢稳态；CDKN2A则通过细胞周期调控减轻毒性损伤，三者敲除均会增强细胞对铜死亡的敏感性。 转运调控通路 CTR1（铜转运蛋白1）负责铜离子摄入，ATP7A/B负责铜外排，二者平衡直接决定细胞内铜浓度；Nrf2信号通路则通过上调抗氧化基因（如HO-1）对抗铜诱导的氧化应激。 铜死亡的生理和病理意义 生理功能 作为金属代谢稳态的“监控器”，铜死亡可选择性清除铜转运或储存功能异常的细胞，避免铜离子在组织
素，但也有的能固定游离氮素。植物把硝酸盐还原成为氨盐过程的最初阶段，是靠硝酸还原酶的作用。 A． Nason和 H． J． Evans等人已经阐明这种酶含有 Mo和 FAD。这种酶在真菌类（链孢霉等）中也有所发现。可是在这些真菌类的硝酸还原中却存在有另外一种机制，硝酸还原的生理意义，除了作为蛋白质的合成途径外，还起着一种无氧呼吸（硝酸呼吸，即以硝酸代替氧，形成末端电子受体）的作用。有些细菌并不把硝酸还原成为氨以氮素形态释放出来，而是表现脱氮作用，另外，同样在土壤中，有些细菌也能把氨盐或亚硝酸盐氧化成为硝酸
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