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- XK-SJH-A511
- 国产
- 2025年07月18日
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- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
β-1,3-Glucanase (β-1,3-GA) test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/24样
β-1,3 葡聚糖酶（β-1,3-glucanase，β-1,3-GA）试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化 β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下，可诱导细胞大量合成 β-1,3-GA，因此 β-1,3-GA 活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。测定原理：
β-1,3-GA 水解昆布多糖，内切 β-1,3-葡萄糖苷键，产生还原末端，通过测定还原糖生成速率来计算其酶活性。自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。试剂组成和配制：
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存；试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 3mL 蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂 4℃ 保存；
试剂二：液体 30mL×1 瓶，4℃保存；
粗酶液提取：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 12000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入
1mL 提取液），进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 550nm，蒸馏水调零。2、样本测定（在 1.5mL EP 管中依次加入下列试剂）：
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 |
| 样本 | 100 | 100 |
| 蒸馏水 | 100 | |
| 试剂一 | 100 |
| 试剂二 | 600 | 600 |
β-1,3-GA 活性计算：
1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.0958x -0.0192；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。
β-1,3-GA(mg/h/mL)=[( ΔA +0.0192)÷0.0958×V1]÷V1=10.438×(ΔA +0.0192)
3、细胞、细菌和组织中 β-1,3-GA 活力的计算
（1） 按蛋白浓度计算
单位的定义：每 mg 组织蛋白每小时产生 1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(mg/h/mg prot)=[( ΔA +0.0192)÷0.0958 ×V1]÷(V1 ×Cpr)=10.438 ×(ΔA +0.0192)
÷Cpr
- 按样本鲜重计算
β-1,3-GA(mg/h /g 鲜重)=[( ΔA +0.0192)÷0.09585×V1]÷(W×V1÷V2)=10.438×(ΔA +0.0192)
÷W
- 按细菌或细胞密度计算
β-1,3-GA(mg/h /104 cell)= [( ΔA +0.0192)÷0.0958×V1]÷(500×V1÷V2)=0.0208×(ΔA+0.0192)
V1：加入反应体系中样本体积，0.1mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；500：细菌或细胞总数，500 万。
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文献和实验几乎所有的赤霉素，在提取时，从乙酸乙酯的酸可溶性部分中所得到的都是游离型赤霉素。也有一些赤霉素是以与其他分子相结合的形态而存在，对这种类型的赤霉素，总称为结合型赤霉素（ bound或 conjugated gibberellin）。对葡糖配糖体（例如 3-O-β -葡糖基 GA3 ）和葡糖酯（ GA4 葡糖酯）可以进行分离鉴定。前者为极性大的水溶性物质，可用 n-丁醇提取；后者被认为是中性赤霉素（ neutral gibberellin
以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 新鲜血液样品（ 200 μl ）2. 无水乙醇，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
动物组织总 RNA 提取试剂盒操作指南（DP431） ——动物组织
以下操作按照天根产品 DP431 动物组织总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 动物组织（50-100 mg）2. 无水乙醇 ，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I 配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml）；1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 研磨器 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文
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