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- 提供商:
威奥生物
- 服务名称:
RIP技术实验
- 规格:
样本
免疫共沉淀(Co-IP蛋白与蛋白)
(1)相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;(2)蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;
(3)可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
CHIP实验(DNA-蛋白相互作用)
染色质免疫沉淀法 (ChIP) 是一种基于抗体的技术,可用来选择性地使特异性 DNA 结合蛋白及其 DNA 靶标富集。 ChIP 可用来研究某种特殊的蛋白-DNA 相互作用、多种蛋白-DNA 相互作用或全基因组或部分基因内的相互作用。 ChIP 使用可选择性地检测和结合蛋白的抗体,包括组蛋白、组蛋白修饰、转录因子、...
RIP(RNA 结合蛋白免疫沉淀)
用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白。 防止非特异性的RNA的结合。 免疫沉淀把RNA结合蛋白及其结合的RNA一起分离出来。 结合的RNA序列通过microarray(RIP-Chip),定量RT-PCR或高通量测序(RIP-Seq)方法来鉴定。
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文献和实验某个实验间隙… 萌新:开题报告已提交,转眼 1 个月过去了,实验还是一头雾水,为啥我的 co-IP 拉不下来蛋白? 奋斗中的师兄:我当初正好相反,拉下来的蛋白被抗体条带覆盖住了,换个抗体忒不好找,无奈换了个蛋白,还好挺顺利。 大师兄:蛋白吧,不但种类多,理化性质差异较大,关键它们又喜欢组队在细胞里干活,IP、co-IP 又是常用的手段,掌握好这个工具还是很重要的,总不能随随便便就换个蛋白。 那要怎么快速掌握这项实验,轻松搞定各种疑难杂症呢? 我们依据三十多年的 IP/co-IP 实验经验,总结
了,要分开难度还是很大,这时候就要很慎重,实验过程要十分肯定检测有这么一条目的条带才行。最好还是能找到不同来源的抗体啦~~ hiqihong 不同种源的抗体WB验证有时在IgG位置也出现条带 最好的办法是用洗脱buffer洗脱 如果是用tag做的IP 则用tag肽洗脱,IgG是能洗掉的 devil19840 紫叶竹韵 wrote: 做IP,之后Western 分析,看到有两条带
一、原理: 免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)技术是检测蛋白质间相互作用的经典方法,基本原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵,将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育,促进免疫复合物的形成;随后加入能够与抗体Fc段结合的proreinA/G(预先结合固化在琼脂糖小珠上),形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-proteinA/G小珠”复合物,纯化该复合物后凝胶电泳分离蛋白,应用Westernblot或者质谱技术鉴定靶蛋白的结合蛋白。 与其它研究方法相比,免疫










