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- 2025年07月14日
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- 技术资料
- 库存：
69
- 英文名：
Total antioxidant capacity (ABTS method) test box
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/48样
总抗氧化能力 (ABTS 法)试剂盒
分光光度法 50T/48S
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。研究意义：
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
测定原理：
ABTS 法是使用最广泛的间接检测方法，可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定。ABTS 经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子自由基 ABTS+，能溶于水相或酸性乙醇介质中，在 734nm处有最大吸收。被测物质加入 ABTS+溶液后，所含抗氧化成分能与 ABTS+发生反应而使反应体系褪色。在 734nm 检测吸光度的变化，并以 Trolox 作为对照体系量化抗氧化物质的抗氧化能力。自备实验用品：
恒温水浴锅、低温离心机、分光光度计、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。试剂组成和配制：
提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 60mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂二：粉剂×2 瓶，4℃避光保存。
样品的制备：
- 血清、血浆、唾液或尿液等液体样品
10min，取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定，也可以-80℃冻存（不宜超过
30 d）后再测定。
- 组织样品
提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
- 细胞样品
1mL 提取液），冰浴超声波破碎（功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；10000g，
4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
操作步骤：
1、 分光光度计预热 30min，调节波长至 734nm。2、 工作液的配置：临用前取试剂二一瓶，加入 25mL 试剂一，震荡混匀 20min 后，静置， 取上清使用。（注意，现配现用）
3、操作表（在 EP 管中反应）
| 空白管 | 测定管 | |
| 提取液（μL） | 50 | |
| 样品（μL） | 50 | |
| 工作液（μL） | 950 | 950 |
| 充分混匀，10min 内测定 734nm 吸光值，△A= A 空白-A 测定 | ||
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总抗氧化能力计算公式：
1、以自由基清除率表示：
ABTS 自由基清除率（％）=（A 空白-A 测定）÷A 空白×100％2、以标准曲线上获得的抗氧化剂 Trolox 的量表示：
标准曲线：y = 1.4042x - 0.0012 R2 = 0.9985 x:Trolox 浓度(μmol/mL)y:吸光值差值△A
单位定义:用从标准曲线上获得的抗氧化剂Trolox 的量来表示样本的ABTS 自由基清除能力。
- 按样本质量计算
=0.712×（△A+0.0012）÷W
- 按样本蛋白浓度计算
=0.712×（△A+0.0012）÷Cp r
(3) 按细胞计算
总抗氧化能力（μmol Trolox/104cell）=（△A+0.0012）÷1.4042×V 样÷（V 样÷V 样总×细胞数量（万个））
= 0.712×（△A+0.0012）÷ 细胞数量（万个）
- 按液体体积计算
=0.712×（△A+0.0012）
V 样总：加入提取液体积，1 mL；V 样：反应中样品体积，50μL；W：样品质量，g；Cpr： 样本蛋白浓度，mg/mL
注意事项：
- 尽量避免使用在中碱性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂，否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。
- 样品中不宜添加Tween、Triton 和 NP-40 等去垢剂和DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂。
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