- ￥4980
- Xkbio
- XK-SJH-A378
- 国产
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Hydroxymethylglutaryl Coenzyme A Synthetase (HMGCS) Test Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/48样
羟甲基戊二酰辅酶 A 合成酶（HMGCS）试剂盒
分光光度法 50 管/48 样正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义羟甲基戊二酰辅酶 A 合酶是甲羟戊酸代谢途径中的关键酶，催化乙酰 CoA 与乙酰乙酰 CoA
生成羟甲基戊二酰 CoA。
测定原理
HMGCS 催化乙酰 CoA 与乙酰乙酰 CoA 生成羟甲基戊二酰 CoA，同时产生 CoASH，使 DTNB转化为黄色的 TNB，在 412nm 下有特征吸光值。
所需的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制
提取液：60mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存；临用前加入 7mL 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；
试剂二：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存；临用前加入 7mL 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；
试剂三：15mL×1 瓶，4℃避光保存。
样本测定的准备
1、细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
相关图片：
测定步骤
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 412nm，蒸馏水调零。2、 在 1 mL 玻璃比色皿中加入 125μL 试剂一、125μL 试剂二和 250μL 试剂三，混匀，加入
500μL 样本上清，迅速混匀后记录 412nm 下初始吸光值 A1 和 4min 后的吸光值 A2。计算 ΔA＝A2-A1。
HMGCS 活性计算
1、血清（浆）活性
单位定义：每 mL 血清（浆）每分钟催化产生 1nmolTNB 为一个酶活力单位。
HMGCS（nmol/min /mL）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷V 样 ÷T=36.76×ΔA 2、组织、细菌或细胞 HMGCS 活性
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1nmolTNB 为一个酶活力单位。
HMGCS（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=36.76×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算
- 按细菌或细胞密度计算
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技术资料羟甲基戊二酰辅酶A合成酶（HMGCS）测试盒
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