- ￥1580
- Xkbio
- XK-SJH-A530
- 国产
- 2025年07月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
β-xylosidase assay kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/48样
β-木糖苷酶（β- xylosidase）测定试剂盒说明书
微量法 100T/48S
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义：β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。
测定原理：
β-木糖苷酶催化对硝基ben酚-β-D-木糖苷产生对硝基ben酚，对硝基ben酚在 405nm 处有特征吸收峰，测定 405nm 光吸收增加速率，可计算 β-木糖苷酶活性。自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。试剂组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 1mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂二：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。粗酶液提取：- 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，
- 细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7秒，总时间 3min）；然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。
- 液体：直接检测。
测定操作表：
1、 分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 405nm。2、操作表
| 对照管 | 测定管 | |
| 酶液（μL） | 40 | 40 |
| 试剂一（μL） | 10 | |
| 试剂二（μL） | 80 | 70 |
| 混匀，45℃水浴 20min | ||
| 试剂三（μL） | 80 | 80 |
| 混匀，静置 5min，405nm 处测定吸光值 A，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一 个对照管。 相关图片：   |
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β-木糖苷酶活性计算公式：
-
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、按蛋白浓度计算
酶活定义：45℃，pH7.4 时每毫克蛋白 1min 内催化产生 1 nmol 对硝基ben酚为一个酶活单位。β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mg prot）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T×1000
= 11.34×(ΔA -0.0011)÷ Cpr
2、按样本质量计算：
÷T×1000= 11.34×(ΔA-0.0011)÷W
3. 按细胞数量计算：
酶活定义：45℃，pH7.4 时每 104 个细胞 1min 内催化产生 1 nmol 对硝基ben酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/104cell）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反总÷V 样×V 样总÷细胞数量
（万个）÷T×1000=11.34×(ΔA-0.0011) ÷ 细胞数量（万个）
（4）按液体体积计算
酶活定义：45℃，pH7.4 时每毫升液体 1min 内催化产生 1 nmol 对硝基ben酚为一个酶活单位。β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mL）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反总÷V 样÷T×1000
=11.34×(ΔA-0.0011)
V 样总：加入提取液体积，1mL； V 反总：反应总体积，0.12mL；V 样：反应中样品体积， 0.04mL； Cpr： 样本蛋白浓度， mg/mL； W ： 样品质量， g； T： 反应时间， 20min； 1000:1μmol/L=1000nmol/L
-
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
1、按蛋白浓度计算
酶活定义：45℃，pH7.4 时每毫克蛋白 1min 内催化产生 1 nmol 对硝基ben酚为一个酶活单位。β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mg prot）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T×1000
= 22.68×(ΔA -0.0011)÷ Cpr
2、按样本质量计算：
酶活定义：45℃，pH7.4 时每克样品 1min 内催化产生 1 nmol 对硝基ben酚为一个酶活单位。β-木糖苷酶活性（nmol/min/g 鲜重）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V 反总÷（V 样÷V 样总×W）
÷T×1000= 22.68×(ΔA-0.0011)÷W
3. 按细胞数量计算：
酶活定义：45℃，pH7.4 时每 104 个细胞 1min 内催化产生 1 nmol 对硝基ben酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/104cell）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V 反总÷V 样×V 样总÷细胞数量
（万个）÷T×1000=22.68×(ΔA-0.0011) ÷ 细胞数量（万个）
（4）按液体体积计算
酶活定义：45℃，pH7.4 时每毫升液体 1min 内催化产生 1 nmol 对硝基ben酚为一个酶活单位。β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mL）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V 反总÷V 样÷T×1000
=22.68×(ΔA-0.0011)
V 样总：加入提取液体积，1mL； V 反总：反应总体积，0.12mL；V 样：反应中样品体积， 0.04mL； Cpr： 样本蛋白浓度， mg/mL； W ： 样品质量， g； T： 反应时间， 20min； 1000:1μmol/mL=1000nmol/mL
ΔA 控制在 0.01-1 范围内，若ΔA 大于 1，可适当减小样本量。标准曲线线性范围为：0.01μmol/mL-0.5μmol/mL。
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