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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Total antioxidant capacity (ABTS method) test box
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100管/96样

总抗氧化能力 (ABTS 法)试剂盒
微量法100T/96S
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。研究意义:测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
测定原理:
ABTS 法是使用最广泛的间接检测方法,可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定。ABTS 经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子自由基 ABTS+,能溶于水相或酸性乙醇介质中,在 734nm处有最大吸收。被测物质加入 ABTS+溶液后,所含抗氧化成分能与 ABTS+发生反应而使反应体系褪色。在 734nm 检测吸光度的变化,并以 Trolox 作为对照体系量化抗氧化物质的抗氧化能力。自备实验用品:
恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。试剂组成和配制:
提取液:液体 120mL×1 瓶,4℃保存。试剂一:液体 24mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂二:粉剂×2 瓶,4℃避光保存。样品的制备:
- 血清、血浆、唾液或尿液等液体样品
10min,取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定,也可以-80℃冻存(不宜超过
30 d)后再测定。
- 组织样品
提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
- 细胞样品
1mL 提取液),冰浴超声波破碎(功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);10000g,
4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
操作步骤:
1、 酶标仪预热 30min,调节波长至 734nm。2、 工作液的配置:临用前取试剂二一瓶,加入 11mL 试剂一,震荡混匀 20min 后,静置, 取上清使用。(注意,现配现用)
3、操作表(在 EP 管中反应)
| 空白管 | 测定管 | |
| 提取液(μL) | 10 | |
| 样品(μL) | 10 | |
| 工作液(μL) | 190 | 190 |
| 充分混匀,10min 内测定 734nm 吸光值,△A= A 空白-A 测定 | ||
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总抗氧化能力计算公式:
1、以自由基清除率表示:
ABTS 自由基清除率(%)=(A 空白-A 测定)÷A 空白×100%2、以标准曲线上获得的抗氧化剂 Trolox 的量表示:
标准曲线:y = 0.7021x - 0.0012 R2 = 0.9985 x:Trolox 浓度(μmol/mL)y:吸光值差值△A
单位定义:以标准曲线上获得的抗氧化剂Trolox 的量来表示样本的ABTS 自由基清除能力。
- 按样本质量计算
=1.424×(△A+0.0012)÷W
- 按样本蛋白浓度计算
=1.424×(△A+0.0012)÷Cp r
(3) 按细胞计算
总抗氧化能力(μmol Trolox/104cell)=(△A+0.0012)÷0.7021×V 样÷(V 样÷V 样总×细胞数量(万个))
= 1.424×(△A+0.0012)÷ 细胞数量(万个)
- 按液体体积计算
=1.424×(△A+0.0012)
V 样总:加入提取液体积,1 mL;V 样:反应中样品体积,10μL;W:样品质量,g;Cpr: 样本蛋白浓度,mg/mL
注意事项:
- 尽量避免使用在中碱性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂,否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。
- 样品中不宜添加Tween、Triton 和 NP-40 等去垢剂和DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂。
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