Omn-03 RNA 提取试剂盒（室温型）

Omn-03 RNA  提取试剂盒（室温型）

产品 简介 
本产品是一款不依赖冷冻离心机，可在室温条件下快速提取 RNA 的试剂盒。

特点与优势
1. 可以室温条件下提取 RNA。
2. gDNA 去除柱可以有效去除基因组 DNA，得到高纯度的 RNA。
3. 本试剂盒无需酚/ 氯仿抽提，显著提高实验操作的安全性。

使用说明。
1. 试剂配制：
a) Wash Buffer C（去蛋白液）配制。在去蛋白液中加入 21 mL 无水乙醇，混匀。
b) Wash Buffer D（漂洗液）配制。在漂洗液中加入 24 mL 无水乙醇，混匀。
2. 细胞裂解。
1)  细胞裂解。
a) 贴壁细胞裂解。PBS 洗涤 6 孔板中的贴壁细胞，加入 0.5 mL 裂解液，吹打混匀，转移到 1.5 mL EP 管中，室温静置 3-5 min，保证细胞充分裂解。

b) 悬浮细胞裂解。离心法收集悬浮细胞，按照 5-10×10 6 个细胞加 0.5 mL 裂解液的比例加
入裂解液，混匀，室温静置 3-5 min，保证细胞充分裂解。
2)  组织裂解。称取 10-20 mg 组织，置于 EP 管中，加入 0.5 mL 裂解液，利用手持式电动匀浆
仪对组织块进行匀浆处理。或利用液氮冷冻组织块，经研钵研磨成粉末后转入 EP 管中，再
加入 0.5 mL 的裂解液，用移液器轻轻混匀，室温静置 3-5 min，保证组织充分裂解。
3. 沉淀。细胞裂解液或组织裂解液用最大离心速度（>12,000 × g）离心 5 min，上清转移至新的离
心管，弃沉淀。
4. 将上清液加入 gDNA 去除柱，12,000× g，离心 30 sec，弃 gDNA 去除柱，保留滤液 （含有 RNA） ）。
5. 加入与滤液等体积的无水乙醇，混匀，转入 RNA 纯化柱中，12,000 × g，离心 30 sec，弃滤液。
6. 剩余上清加入对应的 RNA 纯化柱，12,000 × g，离心 30 sec，弃滤液。
7. 向 RNA 纯化柱中加入 0.5 mL Wash Buffer C（去蛋白液），12,000 × g，离心 30 sec，弃滤液。
8. 向 RNA 纯化柱中加入 0.5 mL Wash Buffer D（漂洗液），12,000 × g，离心 2 min，弃滤液。
9. 将 RNA 纯化柱插入新的 RNase-free EP 管中，向柱中央滴加 100 μl Elution Buffer R（洗脱液）或
RNase-free ddH 2 O，室温静置 2 min，
10. 12,000× g，离心 2 min，得到 RNA 溶液。
11. 立即用于反转录等实验，或保存于-80 ℃冰箱。