Omn-01 TRIZOL 型RNA 提取试剂

Omn-01 TRIZOL 型RNA  提取试剂
产品 简介 
RNA 提取试剂（TRIZOL 型）是一款基于 TRIZOL 配方和原理设计的 RNA 提取试剂，通过酚/
氯仿抽提，可以高效的提取细胞、细菌、动物组织和植物组织中的 RNA，用于反转录和 Northern blot
等生物学实验。

特点与优势
1. 适用于多种类型生物样品的 RNA 提取。
2. 可以快速获得高纯度的 RNA。

使用说明
1. 细胞或组织裂解。
1)  细胞裂解。
a) 贴壁细胞裂解。6 孔板培养细胞，弃培养液，预冷的 PBS 洗涤一次，加入 1 mL RNA
提取试剂（TRIZOL 型），吹打混匀，转移到 1.5 mL EP 管中，室温静置 3-5 min。
b) 悬浮细胞裂解。离心收集悬浮细胞，按照 5-10×10 6 个细胞需要 1 mL RNA 提取试剂
（TRIZOL）的比例加入试剂，混匀，室温静置 3-5 min。
2)  组织裂解。称取 10-50 mg 组织，置于 EP 管中，加入 1 mL RNA 提取试剂（TRIZOL 型），
利用手持式电动匀浆仪进行匀浆处理，室温静置 3-5 min。
2. 加入 200 μL 氯仿，剧烈震荡（Vortex）15 sec。
3. 12,000 ×g，4 ℃，离心 10 min，样品分为三层，RNA 集中在上层的无色水相中，DNA 集中在中
间层，而蛋白集中在下层的淡紫红色液相中。
4. 转移上层水相至新的 EP 管，加入等体积的异丙醇，颠倒混匀 10-20 次。
5. 12,000×g，4 ℃离心 10 min，可以在管底或管壁上看到白色凝胶状的 RNA 沉淀，弃上清液。
6. 加入 1 mL 75%的乙醇，轻微震荡 15sec，洗涤 RNA 沉淀。
7. 12,000×g，4 ℃离心 5 min，RNA 沉淀到管底，弃上清。
8. 瞬时高速离心，使管壁上的液体离心到管底，利用微量移液器吸尽液体。
9. 加入 100-200 μL RNA 溶解液或 RNase-free ddH 2 O，溶解 RNA。
10. 测定 RNA 浓度与纯度，用于反转录或其它实验，或保存于-80℃冰箱。

注意事项
1. 蛋白、多糖或脂类含量较高的组织，裂解后可能存在沉淀或油状漂浮物，12,000×g，4 ℃离心
10 min 除去沉淀或其它杂物，上清转入新的离心管，再加入氯仿，进行后续实验。
2. 转移上层水相时若吸入中间层或下层液体，则导致 DNA 或蛋白污染，降低 RNA 纯度。
3. 若细胞数量较少（少于 1×10 5 ）或组织块较小（小于 10 mg）时，RNA 总量较少，可以联合
RNA 纯化柱来提取 RNA。
4.  本 试剂具 有腐蚀性与刺激性，使用时请穿好实验服、佩戴乳胶手套和安全眼镜， 避免试剂 飞溅
导致的皮肤、眼 睛或者呼吸道等部位的化学灼伤。如果不慎接触 皮肤 或者眼睛，请立即用大量
水冲洗，必要时去医院护理。