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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 保质期:
12个月
- 供应商:
科邦兴业(北京)科技有限公司
- 保存条件:
常温
- 规格:
50次
产品 简介
RNA 提取试剂盒(纯化柱型)是一款利用 RNA 纯化柱与相关裂解-漂洗缓冲液组成的 RNA 提取
系统,同时利用 gDNA 去除柱去除基因组 DNA,快速提取高纯度的 RNA。
特点与优势
1. 本产品可以快速(20 min)提取 RNA。
2. gDNA 去除柱可以有效去除基因组 DNA,得到高纯度的 RNA。
3. 本试剂盒无需酚/ 氯仿抽提,及氯化锂或异丙醇沉淀,显著提高实验操作的安全性。
使用说明
1. 试剂配制。在 Wash Buffer B(漂洗液)中加入 35 mL 无水乙醇,混匀。
2. 细胞和组织裂解。
1) 细胞裂解。
a) 贴壁细胞裂解。胰酶消化法收集细胞并计数,按照细胞数量添加一定体积的裂解液,混匀,室
温裂解 3 min。或根据细胞培养皿大小,直接加入裂解液,吹打混匀,转移到 EP 管中,室温裂
解 3 min。
b) 悬浮细胞裂解。离心收集悬浮细胞并计数,按照细胞数目添加一定体积的裂解液,混匀,室温
裂解 3 min。
2) 动物组织裂解。组织块称重后加入液氮冷冻,研磨成粉末后转入 EP 管,加入裂解液,剧烈震荡
(vortex)20 秒;或将组织块加入裂解液中,利用手持式匀浆器破碎组织,室温裂解 3 min,再
12,000×g,4℃离心 3 min,弃沉淀,上清转移至新的 EP 管,即为组织裂解液。
3. 将细胞裂解液或组织裂解液上清转入 gDNA 去除柱,12, 000×g,4℃离心 30 sec,弃 gDNA 去除柱,
保留滤液(含有 RNA)。
4. 向滤液中加入等体积的 70%乙醇,混匀,转入 RNA 纯化柱,12,000×g,4℃离心 30 sec,弃滤液。
5. 向 RNA 纯化柱中加入 500 μL Wash Buffer A(去蛋白液),12,000×g,4℃离心 30 sec,弃滤液。
6. 向 RNA 纯化柱中加入 500 μL Wash Buffer B(漂洗液),12,000×g,4℃离心 2 min,弃滤液。
7. 将 RNA 纯化柱插入新的 RNase-free 的 EP 管中,向柱中央滴加 100 μL Elution Buffer R (洗脱液)
或 RNase-free ddH 2 O,室温静置 2 min。
8. 12,000×g,4℃离心 2 min,得到 RNA 溶液,立即用于反转录实验,或保存于-80 ℃冰箱中。
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以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 新鲜血液样品( 200 μl )2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
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