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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
6个月
- 保存条件:
冷藏
5min 极速 RNA 提取试剂盒
适用于:细胞/动物组织/植物组织/病毒/体液/血清/血浆/细菌
Cat.No.: HP0158-50 次
描述:本试剂盒采用独特的裂解液,可快速可靠的从细胞、动物组织、植物组织、病毒液样本、抗凝全血、培养细菌中纯化出高纯度的总 RNA。该试剂盒是目前上操作步骤少、用时短的 RNA 提取试剂盒(快 5 分钟)。应用本试剂盒提取的 RNA 可直接用于反转录、基因克隆、定量检测、文库构建、杂交等多种分子生物学实验。
样本使用量及 RNA 产量:
| 样本类型 | 样本量 | RNA 产量 | |
| 培养细胞 | 100~ 107 个 | 0.1~30 μg | |
动物组织 |
肝脏 | 10~40 mg | 10~30 μg |
| 心脏 | 10~40 mg | 5~10 μg | |
| 脑 | 10~40 mg | 5~10 μg | |
| 肌肉 | 10~40 mg | 2~10 μg | |
| 植物组织(叶片、茎等) | 40~100 mg | 5~30 μg | |
| 病毒液/体液/血清/血浆 | 150 μl | 0.5~5 μg | |
| *培养细菌 | 106~109 个 | 0.5~15 μg | |
组分(以下组分全部室温避光保存)
| 名称 | 数量 |
| RNA LB1 | 15 ml |
| RNA BB2 | 40 ml |
| Washing Buffer(已含乙醇) | 55 ml |
| Nuclease Free H2O | 10 ml |
| 吸附柱 | 50 套 |
| 1.5mL Nuclease Free 收集管 | 50 个 |
注意事项:
- 本试剂盒中的 Washing Buffer 中已经加乙醇,无需单独添加。
- RNA LB1 和 RNA BB2 均具有腐蚀性,注意防护。
操作方法
(1)裂解/上柱(1.5ml EP 管中处理)培养细胞:胰酶消化完毕后,离心收集细胞沉淀,用 20~30μl 水或PBS 重悬细胞沉淀(务必重悬充分)。加入 120μl RNA LB1 漩涡混匀 30s(有未溶解的细胞团块,用枪头吹打,助溶解),加入 500μl RNA BB2 上下颠倒混合均匀,倒入吸附柱中。13000rpm 离心 30s, 倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
组织样品 采用研钵进行研磨:用液氮研磨粉碎组织样本,将研
磨粉碎的样品加入到 200μl RNA LB1 中,漩涡混合均匀 1min(有块状组织未溶解的,要使用枪头吹打,助消化),加入 500μl RNA BB2 上下颠倒混合均匀,13000rpm 离心 15s。将上清倒入吸附柱中(动作需轻柔,勿将未消化的组织块倒入吸附柱),13000rpm 离心 30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
组织样品 采用钢珠进行研磨:将组织样品加入到 300μl RNA
LB1 中(1.5ml EP 管),并加入几粒钢珠,置于组织研磨仪中,研磨 1~2min。向研磨后的匀浆液中加入 750μl RNA BB2,漩涡混匀5s,13000rpm 离心 1min。用 1ml 吸头吸取 750μl 上清液到吸附柱中。13000rpm 离心 30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。注意:植物组织的匀浆效果通常较动物组织差一些,所以一般推荐采用液氮条件下研钵来研磨。在采用钢珠研磨的条件下务必将组织研磨粉碎,否则会导致产率降低。
病毒液 /体液 /血清 /血浆:吸取 150μl 病毒液/体液样品到加入到120μl RNA LB1 中,漩涡混合均匀 30s。直接加入 500μl RNA BB2 中,漩涡混合均匀 15s。倒入吸附柱中,13000rpm 离心 30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
培养细菌:收集菌体后,用 20~30μl 水重悬菌体(务必重悬充分),加入 120μl RNA LB1 漩涡混匀 30s,加入 500μl RNA BB2 上下颠倒混合均匀,倒入吸附柱中。13000rpm 离心 30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
(2) 洗涤和洗脱
向吸附柱中加入 500μl Washing Buffer,13000rpm 离心 15s。重复此步骤一次。 将吸附柱重新放回离心机,13000rpm 空离心1min,将残留的乙醇彻底甩干。 将吸附柱芯放入到 2mL Nuclease Free 收集管中,向吸附柱芯中加入 20~50μl Nuclease Free H2O, 室温放置 1min,13,000rpm 离心 1min,洗脱液即为提取的 RNA, 冷冻保存。注意:本产品仅供研究用,请勿用于人体及动物的治疗、临床诊断或作为食品、化妆品、家庭用品的添加剂等用途。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 新鲜血液样品( 200 μl )2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP419) ——植物
以下操作按照天根产品 DP419 RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 氯仿3. 移液器及配套 RNase-free 无菌枪头(200 μl ,1ml),1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 涡旋振荡器,台式低温离心机实验准备-试剂盒准备:第一次使用前应在去蛋白液 RD、漂洗液 RW 中
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