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5min 极速 RNA 提取试剂盒

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  • 赫澎生物
  • HP0158-50 次
  • 上海
  • 2025年11月05日
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      6个月

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      冷藏


    5min 极速 RNA 提取试剂盒
    适用于:细胞/动物组织/植物组织/病毒/体液/血清/血浆/细菌
    Cat.No.: HP0158-50 

     
     

    描述:本试剂盒采用独特的裂解液,可快速可靠的从细胞、动物组织、植物组织、病毒液样本、抗凝全血、培养细菌中纯化出高纯度的总 RNA。该试剂盒是目前上操作步骤少、用时短的 RNA 提取试剂盒5 分钟。应用本试剂盒提取的 RNA 可直接用于反转录、基因克隆、定量检测、文库构建、杂交等多种分子生物学实验。
     

    样本使用量及 RNA 产量:

     
    样本类型 样本量 RNA 产量
    培养细胞 100~ 107  0.1~30 μg


    动物组织
    肝脏 10~40 mg 10~30 μg
    心脏 10~40 mg 5~10 μg
    10~40 mg 5~10 μg
    肌肉 10~40 mg 2~10 μg
    植物组织叶片、茎等 40~100 mg 5~30 μg
    病毒液/体液/血清/血浆 150 μl 0.5~5 μg
    *培养细菌 106~109  0.5~15 μg
    *以大肠杆菌为例,1×109/ml 细菌的 OD6001

     

    组分(以下组分全部室温避光保存)

     
    名称 数量
    RNA LB1 15 ml
    RNA BB2 40 ml
    Washing Buffer(已含乙醇) 55 ml
    Nuclease Free H2O 10 ml
    吸附柱 50
    1.5mL Nuclease Free 收集管 50

    注意事项:
    1. 本试剂盒中的 Washing Buffer 中已经加乙醇,无需单独添加。
    2. RNA LB1 RNA BB2 均具有腐蚀性,注意防护。
     

    操作方法

    1)裂解/上柱(1.5ml EP 管中处理)
    培养细胞:胰酶消化完毕后,离心收集细胞沉淀,用 20~30μl 水或PBS 重悬细胞沉淀(务必重悬充分。加入 120μl RNA LB1 漩涡混30s(有未溶解的细胞团块,用枪头吹打,助溶解),加入 500μl RNA BB2 上下颠倒混合均匀,倒入吸附柱中。13000rpm 离心 30s, 倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。

    组织样品 采用研钵进行研磨:用液氮研磨粉碎组织样本,将研
    磨粉碎的样品加入到 200μl RNA LB1 中,漩涡混合均匀 1min块状组织未溶解的,要使用枪头吹打,助消化,加入 500μl RNA BB2 上下颠倒混合均匀,13000rpm 离心 15s。将上清倒入吸附柱动作需轻柔,勿将未消化的组织块倒入吸附柱13000rpm 30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。

    组织样品 采用钢珠进行研磨:将组织样品加入到 300μl RNA
    LB1 1.5ml EP ,并加入几粒钢珠,置于组织研磨仪中,研1~2min。向研磨后的匀浆液中加入 750μl RNA BB2,漩涡混匀5s13000rpm 离心 1min。用 1ml 吸头吸取 750μl 上清液到吸附柱中。13000rpm 离心 30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。注意:植物组织的匀浆效果通常较动物组织差一些,所以一般推荐采用液氮条件下研钵来研磨。在采用钢珠研磨的条件下务必将组织研磨粉碎,否则会导致产率降低。

    病毒液 /体液 /血清 /血浆:吸取 150μl 病毒液/体液样品到加入到120μl RNA LB1 中,漩涡混合均匀 30s。直接加入 500μl RNA BB2 中,漩涡混合均匀 15s。倒入吸附柱中,13000rpm 离心 30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。

    培养细菌:收集菌体后,用 20~30μl 水重悬菌体务必重悬充分加入 120μl RNA LB1 漩涡混匀 30s,加入 500μl RNA BB2 上下颠倒混合均匀,倒入吸附柱中。13000rpm 离心 30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
     

    2) 洗涤和洗脱

    向吸附柱中加入 500μl Washing Buffer13000rpm 离心 15s。重复此步骤一次。 将吸附柱重新放回离心机,13000rpm 空离心1min,将残留的乙醇彻底甩干。 将吸附柱芯放入到 2mL Nuclease Free 收集管中,向吸附柱芯中加入 20~50μl Nuclease Free H2O室温放置 1min13,000rpm 离心 1min,洗脱液即为提取的 RNA, 冷冻保存。



    注意:本产品仅供研究用,请勿用于人体及动物的治疗、临床诊断或作为食品、化妆品、家庭用品的添加剂等用途。
     

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