- ￥620
- LABLEAD
- 北京
- 22066-10MG
- 2025年11月21日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 英文名：
DiO (细胞膜绿色荧光探针)
- 供应商：
LABLEAD
- 规格：
10MG
存储条件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。
产品描述
DiD，DiO，DiI，DiR和DiS染料是一族亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色，这类染料在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显：DiI（橙色荧光），DiO（绿色荧光），DiD（红色荧光）和 DiR（深红色荧光）这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分别用标准的 FITC和TRITC的滤光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激发，有着比DiI更长的激发波长和发射波长，在细胞和组织染色中更有价值。DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织，在活体成像中用来示踪。
使用方法
1. DiD， DiO，Di I，Di R和DiS细胞膜染色液制备
（1）配置储存液用DMSO或EtOH配置浓度1～5 mM。
注意：未使用的储存液保存在-20℃，避免反复冻融。
（2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，配制浓度为1～5 µM的工作液。
注意：工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
2.悬浮细胞染色
（1）悬浮细胞密度为 1 × 106 /mL加入到工作液中。
（2）在37 ℃培养细胞 2～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。
（3）染色细胞试管在1000～1500转离心5分钟。
（4）倾倒上清液，再次缓慢加入预温37℃的培养液。
（5）重复（3），（4）步骤两次以上。
3.粘壁细胞的染色
（1）使粘壁的细胞在无菌实验室培养。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）在盖玻片的一⻆加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
（4）在37 ℃培养细胞 2～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。
（5）吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，培养5～10分钟，然后吸干培养基。
4.显微镜检测
（1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参考表1。
（2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：
a : DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；
b : DiI和DiD＝Omega XF92， Chroma 51007；
c : DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005
5.流式细胞仪的检测
DiD，DiO，DiI，DiR和DiS 染色的细胞可以分别用经典的FL1，FL2，FL3和FL4流式细胞仪检测。
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文献和实验外观：因为高脂饮食，毛发看起来有些「油腻」。 活动：因 DIO 的肥胖表型，多数小鼠看起来比较「慵懒」，不爱动。 脱毛：因 B6 品系的特性，容易出现理毛导致的脱毛，需关注是否有继发皮肤炎症反应。 运输应激：DIO 小鼠在经历运输后容易出现体重降低的情况。根据友商资料和我们的历史数据，运输后 DIO 平均体重减轻在 10%-15%。一般需要经过 2 周左右的适应性饲养，体重可以恢复到出库水平。 打架现象：因雄鼠的天性问题，可能会出现打架的情况，建议不要将不同笼小鼠进行混装。 B6 小鼠会
，也可使流动性加大。 生物膜适宜的流动性是体现生物膜正常功能的必要条件，在一定范围内，膜流动性增加，有利于膜中酶分子的扩散和旋转运动，使酶活性增加。一些载体蛋白分子的运动性也取决于膜中脂类分子的流动性。研究发现肿瘤对化疗药物产生的耐药性主要与细胞膜P糖蛋白过度表达谷胱甘肽及其相关酶系活性改变有关，也有许多研究表明耐药细胞膜流动性较亲代敏感细胞明显增加。另有实验研究发现腹水癌细胞的恶性程度随着膜流动性的增加而增加，白血病及转移的肿瘤细胞的膜流动性远远高于非转移细胞。因此，对敏感及耐药的肿瘤细胞膜
光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光）。其中DiR的红外荧光可穿透细胞和组织，在活体成像中用来示踪。 图3 DiI 标记的外泌体通过静脉注射观察在体内器官的分布情况 J Cereb Blood Flow Metab. 2018 May;38(5):767-779. 图4 DiO 标记的外泌体与 HCT116 细胞共孵育 BMC Cancer. 2018 Jan 6;18(1):47. 图5 DiR 标记的外泌体静脉注射小鼠结肠癌肿瘤模型 J
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