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RM-1+LUC小鼠前列腺癌细胞-荧光素酶标记

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  • 厦门
  • 2025年08月21日
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    • 品系

      小鼠细胞株

    • 细胞类型

      贴壁生长

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    • 供应商

      厦门逸漠生物科技有限公司

    • 库存

      999

    • 英文名

      RM-1-LUC-PURO

    • 生长状态

      正常

    • 年限

      长期

    • 运输方式

      复苏发货或干冰发货(顺丰快递)

    • 器官来源

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    • 是否是肿瘤细胞

    • 细胞形态

      上皮细胞样

    • 免疫类型

      详询

    • 物种来源

      小鼠

    • 相关疾病

      详询

    • 组织来源

      前列腺

    • 规格

      1*10^6

    产品基本参数

    细胞名称:RM-1-luc,小鼠前列腺癌细胞+luc

    种属来源:小鼠

    组织来源:前列腺

    细胞形态:上皮细胞样

    生长特性:贴壁生长

    培养基:: 90%RPMI-1640+10% FBS+PS

    生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

    传代方法:1:2至1:3,每周 3次

    冻存条件:无血清冻存液,液氮储存

    支原体检测:无

    注:该细胞puro药筛浓度为1.0ug/ml,培养过程中可不用再添加puro,如若担心抗性随着传代时间降低,可定期用0.5ug/ml浓度puro维持。

    细胞培养操作

    1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

    a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。

    c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。

    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

    a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

    b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。

    c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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