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锐博生物
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信号通路报告基因载体
技术特色:
■ 我们提供的载体均为非病毒载体
■ 过表达载体有 NeoR 或EGFP 等不同标记的骨架可选
■ 可根据客户的不同需求构建不同的表达载体,能够保证所克隆序列的正确性及完整性
■ 在哺乳动物细胞内高效过表达
■ 提供对应的质粒(2*5ug)、甘油菌(100μL )和实验报告书
细胞通过胞内胞外的受体与配体(信号分子)结合,产生一系列的信号传导,使细胞对环境变化做出一系列反应。信号通路非常多样,而每个信号通路往往也由数十个基因参与调控,信号通路研究是目前生物学及药物基础性研究的重点。锐博生物的信号通路报告基因载体pREG-RB和pREL,分别以EGFP和海肾萤光素酶为报告基因,在将信号通路关键转录因子的结合序列(recognition motif或binding motif)克隆至报告基因上游,一旦细胞感受到特定的信号活化该信号通路,则激活报告基因的转录表达,从而可通过信号通路报告基因载体检测信号通路的活化情况。
以EGFP为报告基因非常适用于高内涵平台筛选对特定信号通路有活化或抑制作用的药物筛选,或者筛选在信号通路中起作用的基因,或者鉴定基因对信号通路活化的影响;以海肾萤光素酶为报告基因则适合使用多功能酶标仪或萤光照度计进行简易的检测。
参考文献或案例
[1] Yang L, Han B, Zhang Y, et al. Engagement of circular RNA HECW2 in the nonautophagic role of ATG5 implicated in the endothelial-mesenchymal transition[J]. Autophagy, 2018, 14(3): 404-418. (IF:11.059 锐博产品:miRNA载体 研究领域:自噬 东南大学)
[2] Yang C, Yuan W, Yang X, et al. Circular RNA circ-ITCH inhibits bladder cancer progression by sponging miR-17/miR-224 and regulating p21, PTEN expression[J]. Molecular cancer, 2018, 17(1): 19. (IF:10.679 锐博产品:环状RNA载体 研究领域:膀胱癌 南京医科大学第一附属医院)
[3] Han B, Zhang Y, Zhang Y, et al. Novel insight into circular RNA HECTD1 in astrocyte activation via autophagy by targeting MIR142-TIPARP: implications for cerebral ischemic stroke[J]. Autophagy, 2018, 14(7): 1164-1184. (IF:17.848 锐博产品:miRNA载体、茎环法引物、mimic 研究领域:缺血性卒中 东南大学)
[4] Liu Z, Chen X, Zhang Z, et al. Nanofibrous Spongy Microspheres To Distinctly Release miRNA and Growth Factors To Enrich Regulatory T Cells and Rescue Periodontal Bone Loss[J]. ACS nano, 2018, 12(10): 9785-9799. (IF:13.903 锐博产品:miRNA载体 研究领域:牙周骨丢失 北京大学口腔医学院)
[5] Wang H, Chao K, Ng S C, et al. Pro-inflammatory miR-223 mediates the cross-talk between the IL23 pathway and the intestinal barrier in inflammatory bowel disease[J]. Genome biology, 2016, 17(1): 58. (IF:14.028 锐博产品:miRNA载体、mimic & inhibitor 研究领域:炎症性肠病 中山大学第一附属医院)
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文献和实验报告基因载体 (1)报告基因 载体的特点:除了具有表达蛋白质所需要的结构外,理想的报告基因载体本身无调节结合位点或序列,而具有有意插入的调节结合位点,尽管可以从报告基因载体除去已知的结合位点,减少报告基因上游的转录,但从几千kb的DNA中去除所有潜在的调控序列是不可能的。因此在使用报告基因载体时,应使用合适的对照载体。报告基因质粒载体一般在大肠杆菌中繁殖,因此包括一个DNA复制起始点(ori)和基因筛选标记,通常为氨苄西林抗性基因(Ampr)。另外还具有丝状噬菌体复制起始
janetlee1976 在构建萤光素酶报告基因载体的过程中,我把一个基因的一部分启动子插入到载体中(包含该基因转录起始点),请问是否需要为了避免载体中编码萤光素酶的基因的移码突变,而在转录起始点以下所包含的碱基数必须为3的整倍数呢?比如所包含启动子区域为-1000!~+27(此处是否必须为3的整倍数) woxingwosu 我觉得只要从翻译开始,即ATG, 保持碱基数必须为3的整倍数就可以了。前面的启动子部分没有必要。最好
腺相关病毒在骨科研究中的应用现状 腺相关病毒(AAV)属于细小病毒科,病毒颗粒无包膜,结构为直径约 20-26nm 的正二十面体,是迄今发现的一类结构最简单且无法自主复制的线性单链 DNA 病毒,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染力。在研究中常用的重组腺 相关病毒(rAAV)是在非致病性野生型 AAV 的基础上经过改造而成的特异性更强的基因载体,其感染后约 3 周可达 表达高峰。自互补 AAV(scAAV) 是一种经过特殊设计的 AAV,在感染细胞后可以迅速形成双链 DNA,从而绕过了传统
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