- ￥680
- 擎科生物
- TSE014
- 武汉
- 2025年12月27日
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充足
- 英文名：
Trelief® Mouse Direct PCR Kit (for Genotyping)
- 供应商：
北京擎科生物科技股份有限公司
- 保存条件：
Lysis Buffer 2~8°C保存，其余组分-25-15°C保存
- 规格：
5×1.0 mL
Trelief ® Mouse Direct PCR Kit (for Genotyping)
小鼠组织样品直接扩增，适用于多重PCR
【产品简介】
本产品是一款专为小鼠组织直接扩增设计的试剂盒，小鼠组织（尾巴、耳朵、脚趾等）经过简单的裂解处理即可作为PCR扩增模板，无需过夜消化，酚氯仿抽提或柱式纯化等操作，使用更加简便。产品适用干2 kb以内目的片段的扩增以及3对引物以内的多重PCR反应。
本产品所提供的2×Mouse Direct PCR Mix中，包含经过基因工程改造的DNA聚合酶、合适浓度的Mg2+、dNTPs以及优化的缓冲体系，具有极高的扩增效率和抑制物耐受度，使用时只需加入模板和引物，并补水至1×即可进行PCR反应。
【产品特点】
无需复杂的基因组提取步骤，操作简便，省时省力；
改造的DNA聚合酶，具有极高的扩增效率和良好的抑制物耐受度；
添加特异性增强因子，扩增产物具有高特异性；
适用于多种小鼠组织的直接扩增。
【产品应用】
用于小鼠基因敲除分析、转基因检测、基因分型等。
【产品组成及保存】
-25~-15℃保存2年。
| 组分 | 规格 |
| 2×Mouse Direct PCR Mix | 5×1.0 mL |
| Lysis Buffer | 4×20 mL |
| DNA Release | 2×800 μL |
| Positive Control Primer Mix(10 uM each) | 100 μL |
【操作流程】
反应体系
| 组分 | 25 μL 体系 | 50 μL 体系 | 终浓度 |
| 2×Mouse Direct PCR Mix | 12.5 μL | 25 μL | 1× |
| 上游引物（10 μM） | 1 μL | 2 μL | 0.4 μM |
| 下游引物（10 μM） | 1 μL | 2 μL | 0.4 μM |
| 裂解产物 | 0.5~1 μL | 1~2 μL | |
| 灭菌水 | Up to 25 μL | Up to 50 μL |
反应程序
| 温度 | 时间 | 循环数 | ||
| 1 | 预变性 | 94℃ | 5 min | 1 cycle |
| 2 | 变性 | 94℃ | 30 s | 35 cycles |
| 退火 | Tm+3~5℃ | 30 s | ||
| 延伸 | 72℃ | 30 s/kb | ||
| 3 | 终延伸 | 72℃ | 7 min | 1 cycle |
【问题讨论】
Q1：使用本产品阳性对照片段扩增正常，但目的片段无条带或条带弱？
A1:
| 可能原因 | 解决方法 |
| 引物质量差 | 做纯化的基因组模版的对照反应，验证引物质量，若任然无法扩展可重新设计合成引物 |
| 退火温度过高 | 做退火温度梯度 PCR（推荐以2℃）为梯度，摸索最佳反应条件 |
| 延伸时间过短 | 增加延伸时间 |
| DNA 模板量不足 | 适当增加模板用量或增加循环数 |
【实例分享】
本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。
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