大鼠心脏组织免疫组化

1. 实验流程与技术要点

定义：免疫组化（IHC）通过抗原-抗体特异性结合，定位大鼠心脏组织中的特定蛋白质（如胶原、细胞因子）。

• 标准化流程：包括固定、脱蜡、抗原修复、封闭、一抗/二抗孵育、显色（DAB）及封片。
• 抗原修复：微波修复（pH 6.0 柠檬酸盐缓冲液）可提高敏感性，但需根据抗体优化。
• 自动化趋势：多聚物标记法（如Polymer法）缩短步骤（30分钟 vs. SABC法的2小时），减少非特异性染色。
  争议：
• 抗体来源（兔/鼠）与封闭血清匹配性影响结果。
• 内源性过氧化物酶阻断（3%H₂O₂）与背景染色的平衡。

2. 应用领域与研究趋势

定义：用于评估心肌损伤标志物（如TGF-β1、collagen I）、缺血/再灌注损伤及药物干预效果。

• 心肌缺血诊断：内皮素（ET-1）和cTnT表达上调可作为早期诊断指标。
• 药物筛选：复方丹参滴丸通过调节氧化应激改善心肌肥厚。
• 组织工程：大鼠心肌细胞与支架结合可构建功能性心肌组织（收缩力达75%正常水平 ）。