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WB实验服务
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westernblot实验,全长marker整膜条带无惧挑战
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文献和实验2.Pillai-Kastoori L, Schutz-Geschwender AR, Harford JA. A systematic approach to quantitative Western blot analysis. Anal Biochem. 2020;593:113608. doi:10.1016/j.ab.2020.113608
3.Meftahi GH, Bahari Z, Zarei Mahmoudabadi A, Iman M, Jangravi Z. Applications of western blot technique: From bench to bedside. Biochem Mol Biol Educ. 2021;49(4):509-517. doi:10.1002/bmb.21516
4.Kim B. Western Blot Techniques. Methods Mol Biol. 2017;1606:133-139. doi:10.1007/978-1-4939-6990-6_9
5.Hnasko TS, Hnasko RM. The Western Blot. Methods Mol Biol. 2015;1318:87-96. doi:10.1007/978-1-4939-2742-5_9
℃。 实验步骤 凝胶配制 1) 根据目的蛋白分子量按比例配制分离胶,缓慢摇动混匀,避免由于剧烈混匀混入氧气。待凝胶溶液混合均匀后,将混匀的凝胶溶液缓慢注入两层玻璃板中,再在液面上小心注入一层无水乙醇,以阻止氧气接触凝胶溶液影响凝胶的聚合,保持水平,在 37 ℃ 恒温箱中静置约 1 小时,直至凝胶溶液完全聚合凝固。 2) 按比例配制浓缩胶,缓慢摇动混匀,倒掉分离胶上层无水乙醇并用滤纸吸去已凝固分离胶上的无水乙醇,平缓注入浓缩胶溶液,小心插入梳子,避免齿尖产生气泡。在 37 ℃ 恒温箱中
Western blot 实验技巧精要 ——轻松获得高质量 western blot 条带图 Western blot 方法在 SCI 文章中出现的频率非常高,漂亮的 WB 电泳图可以给文章增色不少。但是 WB 实验的步骤琐碎,细节颇多,要想得到令人满意的结果还是需要花费很多时间和精力去摸索实验技巧的。 小编经过了一段时间的努力,已经可以比较轻松的实现用 WB 方法对磷酸化蛋白计算药物的 IC50 值(见下图)。 接下来,小编将结合自己的经验以及网上可以搜索
llh刘丽华 各位好:我做了1个多月western blot了,内参跑得还可以,但是目的蛋白总是跑不好,今天跑出来非特异性条带很清楚,而目的条带却很淡,不知是什么原因!前一次也是这种情况,我就延长封闭时间至2h,一抗1:700,二抗1:5000,请各位高手帮忙分析一下吧!下面是我的图片,最下面,模糊的一条(靠图片中间的一条)是我的目的条带! coffeeshine 如果非特异带很清楚,延长封闭时间没作用










