CRISPR-Cas9基因编辑

给你一把 CRISPR-Cas9 大剪教你玩转小鼠基因编辑

在最新出版（2016.02）的冷泉港实验指南的头版，详细阐述了 CRISPR-Cas9 系统在小鼠基因编辑中应用。 在现代生物学中，实现对小鼠基因进行编辑或许是最重要的进步之一。然而，传统基因工程手段都很费时费力。可编程核酸酶的使用极大的提高了基因编辑技术的准确性（如，锌指核酸酶、转录激活效应核酸酶），但是这些核酸酶的设计和使用仍然纷繁复杂成本高昂。随着下一代可编程核酸酶系列--CRISPR-Cas9 系统的出现，使得基因编辑的能力更加高效准确，与此同时，该系统所涉及的试剂

搞定 CRISPR/Cas9 系统操作

CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具，今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作，仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒，如下图所示： 酶切系统 37 ℃, 3 hr；Run 1% gel，回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端，以利于下游 oligo 退火产物的连接；酶切时请充分，且绝对不能加 CIP 处理

CRISPR基因编辑周期一般多久

基因CRISPR相关产品与服务 CRISPR/Cas9慢病毒产品 提供 sgRNA 与 Cas9 慢病毒包装，交付周期可控、滴度明确。相比自建体系，省去质粒构建、包装、滴度测定的反复试错——这是压缩项目周期最直接的一环。 CRISPR-Pool文库产品 CRISPR-Pool KOUT 文库：全基因组敲除筛选，直接提供成品文库病毒，省去文库构建（通常需要数周）的时间。 CRISPR-Pool SAM 文库：激活筛选文库，同样以成品形式提供。 文库自建是周期最长、技术门槛最高的环节，使用成熟文库可以把筛