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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
ribobio
- 保质期:
1年
- 供应商:
锐博生物
- 规格:
20T
riboMONITOR®转染指示剂试剂盒包含3种染料:riboTRACER™ Green、NUCLEOstain™和DEADstain™,分别是用于检测成功转染细胞、全部细胞和死亡细胞。其中riboTRACER™ Green能够在转染后富集于细胞核,不依赖于siRNA或miRNA序列,可方便、快速、准确地定量分析细胞转染效率,以便对siRNA或miRNA转染条件做进一步优化。
产品优势
1、使用方便:仅需3步,荧光显微镜观察即可
2、准确定量:富集于细胞核,精确定量转染效率
3、毒性分析:可同时分析细胞毒性,优化转染试剂用量
哪种转染试剂适合您?
锐博生物提供从siRNA/miRNA、mRNA/长链RNA到蛋白质的全系列转染试剂,请根据下表确定适合您的转染试剂。
技术支持
评价实验细胞系转染的难易度
不同细胞系的转染效率差异很大,如何鉴定目的细胞系是否适合转染是细胞转染实验的基本问题。通常用荧光标记的siRNA或miRNA进行相应的转染对照试验,但该类转染对照不均匀地分布于细胞各处,有时甚至会粘连成团,很难定量分析细胞的转染效率。riboTRACER™是细胞核富集的核酸指示剂,通过与细胞核染料结合,即可精确定量分析细胞转染效率和细胞毒性。

图1 使用riboMONITOR®检测riboFECT™ CP转染siRNA于不同细胞系的转染效率
Cells transfected with riboTRACER™ Green (100nM) with riboFECT™ CP (5 µl/well), fixed with PFA,
stain with NUCLEOstain™ and DEADstain™, 20X of microscope.

图2 使用riboMONITOR® 转染指示剂检测3种转染试剂转染293T细胞的转染效果
Reagent L的转染试剂细胞毒性较大,易引起细胞大量死亡,Reagent X转染试剂的转染效率不高。
而riboFECT™ CP的转染效率较高,几乎无细胞毒性,能够顺利转染293T细胞。
优化转染条件,监测转染效果
转染试剂用量和细胞密度是转染实验成功的关键,确保转染效果的批次间的稳定性,是实验可重复性的重要保证。riboMONITOR® 通过结合细胞核染料,可快速检测出细胞的转染效率,优化最佳的转染试剂用量及细胞密度,确定最适宜的转染条件,以实现细胞的高效转染,减少实验中不必要的实验摸索

C-D:采用0.4µl和1µl的Reagent L分别进行4万和5万细胞的转染实验,结果表明采用1µl Reagent L,4万细胞进行转染时转染效率最高(C),细胞毒性最小(D)
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了解相关产品详细信息请登录锐博生物官网 https://www.ribobio.com/product-and-service/cell-transfection/transfection-indicator/
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文献和实验,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用
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