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- 用户评价
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Ribobio
- 保质期：
1年
- 供应商：
锐博生物
- 保存条件：
-20°C~-80°C
锐博生物自主开发的riboEDIT™ CRISPR-Cas9体系是采用天然复合物系统（crRNA和tracrRNA）进行基因编辑。 锐博提供基于Cas9 mRNA的全RNA体系和基于Cas9蛋白的RNP体系，tracrRNA可实现大规模合成，靶向DNA目的序列的crRNA可以高通量合成，针对哺乳动物细胞可简单通过化学转染或电转方式进行基因编辑实验。该体系为即用型体系，不需要自行构建gRNA表达载体，无需在病毒级实验室中操作，无DNA组分，并且可实现多个crRNA指导下的多靶点编辑，大大简化前期实验准备与操作步骤。该体系更适合于高通量细胞水平的基因敲除筛选。锐博生物还提供业界领先的编辑效率保证CRISPR-Cas9套装产品，为基因编辑实验提供方便、省时、可靠和高效的解决方案。
产品优势：
1.锐博专利技术：优化的crRNA，tracrRNA和Cas9 mRNA
2.瞬时表达，有效降低脱靶率
3.具有更高的编辑效率
4.毒性更低，激活先天免疫反应更小
5.即用型体系，更加易用，更适合从小规模实验到大规模高通量筛选
6.无需繁琐的克隆构建过程，节约更多人力和时间
7.无需病毒级实验室，大大降低基因编辑对实验环境的要求
riboEDIT™编辑效率保证套装、标准套装
锐博生物提供方便高效的基因编辑套装产品：效率保证套装和标准套装。效率保证套装针对人源基因，利用设计软件挑选评分高的5条crRNA进行合成，基于Cas9 mRNA的体系而配置必备试剂，包括tracrRNA、Cas9 mRNA、mRNA转染试剂、阳性对照crRNA套装、T7E1酶及配套缓冲液等，提供即用型的基因编辑套餐。其中效率保证套装可以实现MHCC97H细胞的T7E1酶切效率至少1条达到30%以上并提供相应的售后服务，标准套装不提供任何编辑效率的保证。
riboEDIT™ CRISPR-Cas9套装产品
| 产品名称 | riboEDIT CRISPR-Cas9 mRNA Set, 20T |
| 编辑效率保证套装* | 套装编号：crG00001 |
| 标准套装 | 套装编号：crS00001 |
*效率保证装：按说明书操作条件下，对MHCC97H细胞的T7E1酶切效率可实现至少1条达到30%以上，若5条均低于30%，客户须提供MHCC97H转染效率与检测方法步骤，经技术分析确认,免费重新优化设计，挑选合成5条crRNA并提供实验技术指导。标准套装不提供编辑效率有效性保证和免费重合服务，更多信息请见说明书。
| 套装名称 | 套装产品内容 |
| riboEDIT CRISPR-Cas9 mRNA Set （基于mRNA的全RNA体系/针对人源细胞） |
riboEDIT™ Designed crRNA（设计合成5条crRNA，每条5nmol） riboEDIT™ tracrRNA， 5nmol riboEDIT™ Positive Control crRNA Validation Set for Human *, 3*5nmol riboFECT™ mRNA Transfection Reagent, 75ul riboEDIT™ Cas9 mRNA (0.5ug/ul), 20ug riboEDIT™ T7EI Enzyme (10U/ul), 100U |
**Positive Control crRNA Validation Set for Human包括针对人源的阳性对照crRNA 5nmol、正向引物5nmol和反向引物5nmol
设计合成crRNA
riboEDIT™ Designed crRNA采用锐博生物优化的生物信息学设计，客户无需具备crRNA/sgRNA设计经验，crRNA包含20个与目标DNA序列互补配对的核苷酸（原间隔序列）和与tracrRNA互补配对的重复序列，涵盖人类和小鼠基因，每个基因设计合成3 – 6段单独的sgRNA，经过严格的PAGE纯化，其他物种crRNA设计需另行评估。
人源和小鼠设计合成crRNA的参考价格：5nmol一条crRNA是1250元。
crRNA阳性对照套装
riboEDIT™ crRNA阳性对照套装用于检测基因剪切体系的正确性，该套装包括阳性对照crRNA、正向引物和反向引物。
化学合成tracrRNA
riboEDIT™ tracrRNA采用化学合成tracrRNA，经PAGE纯化，能够抗核酸酶，能与crRNA结合形成crRNA/tracrRNA复合物，共同指导Cas9蛋白切割双链DNA。
Cas9 mRNA
riboEDIT™ Cas9 mRNA为体外转录生成，具有帽子和polyA尾巴结构，编码序列为人源密码子优化的S. pyogenes Cas9，带有核定位信号（NLS），C端的一个1XFLAG标签，5’非翻译区(5’UTR)及3’非翻译区(3’UTR)，以促进mRNA的翻译和提高mRNA的稳定性，适用于哺乳动物细胞基因编辑。
应用举例：riboEDIT™ CRISPR-Cas9 mRNA与RNP体系高效基因编辑效率
riboEDIT™ Cas9 Expression mRNA具有高效的基因组剪切效率
图1. MHCC97H细胞共转染10pmol riboEDIT™ crRNA、10pmol riboEDIT™ tracrRNA和1ug riboEDIT™ Cas9 mRNA，48小时后 riboEDIT™ T7EI Enzyme酶切检测靶位点的剪切效率，候选7个靶基因的剪切条带及编辑效率。如图所示，#1#2表示同一基因不同位点设计的2条crRNA。
riboEDIT Cas9 RNP具有高效的基因组剪切效率
图2. MHCC97H细胞共转染6pmol riboEDIT™ crRNA、6pmol riboEDIT™ tracrRNA和6pmol riboEDIT™ Cas9 Protein，48小时后 riboEDIT™ T7EI Enzyme酶切检测靶位点的剪切效率，候选7个靶基因的剪切条带及编辑效率。如图所示，#1#2表示同一基因不同位点设计的2条crRNA。
图3. riboEDIT™ CRISPR-Cas9 mRNA基因编辑体系与riboEDIT Cas9 RNP复合物具有等同的靶位点剪切活性。
*相关产品的具体价格如下：
公司荣誉资质
锐博生物自成立以来凭借业界领先的产品与服务，得到了广大客户认可与赞誉。公司荣获“国家火炬计划重点高新技术企业”、“国务院侨办重点华侨华人创业团队”、“广东省高新技术企业”、“广州省企业技术中心”“广东省引进创新科研团队”、“广东省高新技术产品”、“广州开发区瞪羚企业”等荣誉称号，获批成立南方医院转化医学产学研合作基地、广州市博士后创新实践基地、博士后工作站等。公司已通过ISO13485与ISO9001国际质量管理体系标准认证，取得了“中华人民共和国海关A类管理企业”资质，其管理与研发能力得到权威认可。
锐博生物还承担并完成国家高新技术研究发展计划、国家863计划、十二五“重大新药创制”科技重大专项和省市科技攻关等重大科研项目，在非编码核糖核酸（miRNA、piRNA、circRNA和lncRNA）和基因沉默技术领域已取得15项授权发明专利，其中3项为国际发明专利。
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文献和实验在最新出版（2016.02）的冷泉港实验指南的头版，详细阐述了 CRISPR-Cas9 系统在小鼠基因编辑中应用。 在现代生物学中，实现对小鼠基因进行编辑或许是最重要的进步之一。然而，传统基因工程手段都很费时费力。可编程核酸酶的使用极大的提高了基因编辑技术的准确性（如，锌指核酸酶、转录激活效应核酸酶），但是这些核酸酶的设计和使用仍然纷繁复杂成本高昂。随着下一代可编程核酸酶系列--CRISPR-Cas9 系统的出现，使得基因编辑的能力更加高效准确，与此同时，该系统所涉及的试剂
CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具，今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作，仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒，如下图所示： 酶切系统 37 ℃, 3 hr；Run 1% gel，回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端，以利于下游 oligo 退火产物的连接；酶切时请充分，且绝对不能加 CIP 处理
基因CRISPR相关产品与服务 CRISPR/Cas9慢病毒产品 提供 sgRNA 与 Cas9 慢病毒包装，交付周期可控、滴度明确。相比自建体系，省去质粒构建、包装、滴度测定的反复试错——这是压缩项目周期最直接的一环。 CRISPR-Pool文库产品 CRISPR-Pool KOUT 文库：全基因组敲除筛选，直接提供成品文库病毒，省去文库构建（通常需要数周）的时间。 CRISPR-Pool SAM 文库：激活筛选文库，同样以成品形式提供。 文库自建是周期最长、技术门槛最高的环节，使用成熟文库可以把筛
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