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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
一年
- 英文名:
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Hyopneumoniae
- 库存:
10000
- 供应商:
上海炎熙生物科技有限公司
- 规格:
20个反应/50个反应/100个反应
| 规格: | 20个反应 | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50个反应 | 产品价格: | ¥1300.0 |
| 规格: | 100个反应 | 产品价格: | ¥2300.0 |
探针法猪肺炎支原体实时定量PCR试剂盒
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Hyopneumoniae
储存:-20度,避光保存,保质期一年。避免反复冻融。
货号:Mqt-hpn-20 包装:20个反应
货号:Mqt-hpn-50 包装:50个反应
货号:Mqt-hpn-100 包装:100个反应
试剂盒特点:
1, 特异性检测猪肺炎支原体,与其他生物基因组无交叉反应。
2, 灵敏度高,最低检测极限为反应液中2.5个基因组。
3, 使用热启动的Taq酶,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。
4, 带有阳性对照样品,可用于检验试剂盒有效性。
5, 带有dUTP和UDG酶,可降低残留DNA的污染。
猪肺炎支原体(Mycoplasma Hyopneumoniae)是一种无细胞壁的微生物,属于柔膜体纲(Mollicutes),主要感染猪的呼吸道,导致慢性、非化脓性支气管肺炎,是引起猪支原体肺炎(又称猪气喘病或地方性肺炎)的主要病原体。基因组为单条环状双链DNA,大小约1.6-1.8 Mb,编码约1,500个蛋白质,无细胞壁合成基因(如murA)、脂多糖合成酶基因,专性寄生,依赖宿主获取营养。猪肺炎支原体通过顶端附着器结合呼吸道上皮细胞表面的唾液酸受体,抑制宿主纤毛运动,阻碍黏液清除,并分泌粘液素样物质抑制其他病原体粘附,通过抗原变异和分泌蛋白抑制宿主免疫反应实施免疫逃避,病理损伤以支气管周围炎、肺泡实变及纤维化为特征,形成“胰样变”病灶(坏死性支气管肺炎),破坏呼吸道屏障,易继发巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌等感染。
常见的猪肺炎支原体检测方法包括培养法、血清学检测、分子生物学方法,还有最近的快速检测技术。这些方法各有优缺点。
首先是传统的细菌培养法,采用选择性培养基,比如PPLO琼脂,优点是成本低,特异性高,能得到活菌,但缺点也很明显,猪肺炎支原体生长缓慢,培养时间长,可能需要一周以上,而且灵敏度低,容易受其他微生物污染。
其次是血清学检测,比如ELISA和间接血凝试验。ELISA比较常用,可以检测抗体,适合大规模筛查。优点是操作简便,适合高通量,成本相对低。但缺点是不能区分疫苗抗体和感染抗体,早期感染可能检测不到,因为抗体产生有时间延迟。另外,交叉反应可能导致假阳性,比如和其他支原体或病原体的交叉。
第三是快速检测试纸条,比如胶体金免疫层析。这种方法操作简单,现场就能做,不需要复杂设备,适合基层使用。但灵敏度可能不如PCR,可能出现假阴性或假阳性,特别是交叉反应的问题。另外,只能检测抗体,不能区分现症感染还是既往感染。
第四是分子生物学方法,比如PCR和实时荧光定量PCR。PCR的灵敏度高,特异性强,能快速检测,特别是实时PCR还可以定量。但需要专门的设备和人员,成本较高,而且如果样本处理不好,可能会有假阴性。另外,运输和保存样本的条件也很重要,否则DNA降解会影响结果。
还有宏基因组测序,虽然不常用,但用于新发或复杂情况。优点是可以发现多种病原体,全面分析。但成本极高,数据分析复杂,周期长,一般只在特殊情况下使用。
探针法猪肺炎支原体定量PCR试剂盒采用实时荧光定量PCR方法,针对粘附蛋白基因设计引物,经BLAST验证,特异性靶向猪肺炎支原体,与其他生物基因组无交叉反应。对亲缘关系或分布范围较近的11种支原体和10种细菌进行检测,只有猪肺炎支原体可以产生特异性信号,其余均未见交叉反应;对猪肺炎支原体接种28天后的52个呼吸道拭子和灌洗液样品进行检测,得到51个阳性;可见本试剂盒具有物种特异性,可用于组织样本的检测。本试剂盒适用于猪肺炎支原体的检测和鉴定。
本产品仅供研究使用。
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