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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
一年
- 英文名:
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Felis
- 库存:
10000
- 供应商:
上海炎熙生物科技有限公司
- 规格:
20个反应/50个反应/100个反应
| 规格: | 20个反应 | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50个反应 | 产品价格: | ¥1300.0 |
| 规格: | 100个反应 | 产品价格: | ¥2300.0 |
探针法猫支原体实时定量PCR试剂盒
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Felis
货号:Mqt-fel-20 规格:20个反应
货号:Mqt-fel-50 规格:50个反应
货号:Mqt-fel-100 规格:100个反应
储存:-20度,避光保存,保质期一年。避免反复冻融。
试剂盒特点:
1, 特异性检测猫支原体,与其他生物基因组无交叉反应。
2, 灵敏度高,最低检测极限为反应液中<10个拷贝。
3, 使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点;采用热启动方式,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。
4, 带有阳性对照样品,可用于检验试剂盒有效性。
5, 带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。
猫支原体(Mycoplasma Felis)属于柔膜菌纲(Mollicutes),营寄生生活,对猫和马都可致病,可以引起猫的脓性结膜炎、呼吸道感染、关节炎,也可以引起马呼吸道疾病。与寄生生活相适应,其基因组极度精简,代谢能力极为有限,无法自主合成许多必需的生命物质。它缺乏完整的三羧酸循环(TCA循环)和氧化磷酸化途径,主要依赖宿主细胞提供的糖类(如葡萄糖)进行能量代谢,并通过底物水平磷酸化生成ATP。此外,它无法合成大部分氨基酸、嘌呤和嘧啶,必须直接从宿主环境中摄取这些前体物质以维持生长和繁殖。在脂类代谢方面,猫支原体无法合成长链脂肪酸和胆固醇,必须依赖宿主细胞膜提供的脂质成分。这一特性使其在体外培养时通常需要添加血清或其他富含脂质的成分以支持生长。这种代谢上的高度依赖性解释了为何猫支原体在自然环境中严格依赖宿主生存,同时也使其在实验室培养条件下生长缓慢且要求苛刻。
猫支原体的检测方法主要包括培养、分子生物学技术和血清学检测。由于该病原体生长缓慢且培养条件苛刻,传统的细菌分离法在临床诊断中应用较少,通常仅在研究中使用特殊培养基进行分离。目前,聚合酶链反应(PCR)是最常用的检测手段,其针对16S rRNA或其他特异性基因片段进行扩增,具有高灵敏度和特异性,可快速鉴别猫支原体与其他呼吸道病原体。血清学检测(如ELISA或间接免疫荧光试验)可用于检测抗体,适用于流行病学调查,但无法区分现症感染与既往感染。在实践中,PCR结合测序技术可进一步提高检测准确性,尤其适用于混合感染或耐药性监测。
探针法猫支原体定量PCR试剂盒针对一个保守的核糖体蛋白基因进行PCR鉴定,经BLAST验证,特异性靶向猫支原体,与其他生物基因组无交叉反应。使用本试剂盒检测了多种支原体和多个猫结膜拭子样品,证实本试剂盒具有物种特异性,适用于猫支原体的检测和鉴定。
本产品仅供研究使用。不可用于临床诊断。
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文献和实验-time PCR方法克服了由于miRNA分子太短(~22 nt)带来的定量最大难题而引入靶向特异性的反转录引物,该RT引物可以与成熟miRNA结合,形成反转录引物/成熟miRNA复合物,并在miRNA的5’末端延伸。这样就得到一个较长的反转录扩增因子,为进一步做实时定量PCR提供了符合要求的摸板。 RT引物有两种类型: 1. Oligod(T)特异的RT引物(QIAGEN产品为主) 由特异序列+(T)20左右+兼并碱基V或VN组成。(所有miRNA可以公用一个Oligod(T)的RT引物,但是RNA
。3.1 Taqman@探针法Taqman@探针是最早用于定量的方法。就在PCR扩增时加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸:5’端标记一个报告荧光基团,3’端标记一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,也就是FRET反应;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB
初步诊断,然后分离病毒或利用ELISA诊断试剂盒检测抗体而确诊。6. 预防为了预防本病,应严格管理,禁止非工作人员出入饲养区,防止野生动物接触小鼠。从外单位引种时必须确保无本病,方可混群。发病动物立即全群淘汰处死,尸体焚烧,饲养室薰蒸消毒,封闭三个月。二、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎(Lymphocytic Choriomeningitis,LCM)LCM是由淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(Lymphocytic Choriomeningitis Virus ,LCMV)引起的人和许多种动物的人畜
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