人可溶性内皮生长因子ELISA检测试剂盒

人可溶性内皮生长因子ELISA检测试剂盒使用说明书

仅供体外研究使用，不用于临床诊断!
样本处理及要求:
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

需要而未提供的试剂和器材:
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水
    BRG-1    抑癌基因SNF2β抗体
    SRF    血清应答因子抗体
    SREBP-1    胆固醇调节元件结合蛋白1抗体
    SUMO 1    泛素样修饰体-1抗体
    STAT1    信号转导与转录激活因子1抗体
    Spindlin 1    卵巢癌相关蛋白抗体
    MAP126    精子相关抗原5抗体
    alpha-Synuclein (NT)    核突触蛋白-α抗体（N端）
    5-lipoxygenase activating protein    5脂氧合酶激活蛋白抗体
    14-3-3 zeta+delta    14-3-3 protein ζ/δ抗体
    SRGN     硫酸软骨素多糖核心蛋白抗体
    SOAT1    胆固醇酰基转移酶1抗体
    SIRT5    沉默调节蛋白5抗体
    SLC2A4RG    葡萄糖转运蛋白4增强因子抗体
    SLC27A6    脂肪酸转运蛋白6抗体
    SCN5A    电压门控钠通道5α抗体
    Socs 2    细胞因子信号传导抑制蛋白2抗体
    S-100/S100A1    S100A1抗体
    SLC34A2    磷酸钠协同转运蛋白抗体
    SOCS3    细胞因子信号传导抑制蛋白3抗体
    Smad2    细胞信号转导分子Smad-2抗体
    SLC22A6    阴离子转运蛋白-1抗体
    SIAH2    泛素连接酶Siah2
    phospho-Smad3 (Ser204)    磷酸化细胞信号转导分子SMAD3抗体
    4 Hydroxynonenal    4羟基壬烯酸抗体
    Slitrk1    神经突出相关蛋白Slitrk1抗体
    Staphyloccocus aureus Rosenbach tropina    金黄色葡萄球菌菌体蛋白抗体
    Sclerostin    骨形态发生抑制蛋白SOST抗体
    Seladin 1    24脱氢胆固醇还原酶抗体
    SULT2A1    胆盐磺基转移酶
    SOX9    转录因子SOX9蛋白抗体
    phospho-SOX9(Ser181)    磷酸化转录因子SOX9蛋白抗体
    Phospho-SHP2 (Tyr81)    磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗体
    SLC27A2    长链脂肪酸辅酶A连接酶抗体
    SOD3    超氧化物歧化酶3抗体
    Sulfatase 2    硫酸酯酶2蛋白抗体
    SRGAP1    Rho GTP酶激活蛋白13抗体
    SDHB    铬细胞瘤患者抑癌基因SDHB抗体
    SRD5A2    类固醇5α还原酶2抗体
    Sertad1    调控周期蛋白依赖蛋白激酶SEI1抗体
    SERTAD2    调控周期蛋白依赖蛋白激酶SEI2抗体
    SMAD5    细胞信号转导分子SMAD5抗体
    Selenium Binding Protein 1    硒结合蛋白1抗体
    SMAD9    SMAD家族9抗体
    SNF5    转录调控激活蛋白SNF5抗体
    SH2D1A    信号传导T淋巴细胞活化相关蛋白抗体
    SIGLEC9    唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素9抗体
    Salusin alpha    心血管调节肽Salusin-α抗体
    S100B    S100B蛋白抗体
    SOX11    转录因子SOX-11蛋白抗体
    SERBP1    纤溶酶原激活物抑制剂1 RNA结合蛋白抗体
    SFR19    剪接因子，精氨酸/丝氨酸丰富19
    sVEGFR2    可溶性血管内皮生长因子受体2抗体
    SAHH    S腺苷L-同型半胱氨酸水解酶抗体
    phospho-Smad2 (Ser465)    磷酸化Smad2抗体
    SUR1    磺酰脲类药物受体1抗体
    SV2A    突触泡蛋白2A抗体
    Syntaxin 1A(brain)    突触融合蛋白1抗体
    phospho-Alpha synuclein (Tyr133)    磷酸化核突触蛋白α抗体
    phospho-Alpha synuclein (Tyr136)    磷酸化核突触蛋白α抗体
   人可溶性内皮生长因子ELISA检测试剂盒 SLC7A9    离子转运相关蛋白SLC7A9抗体
    SLC33A1    乙酰辅酶A转运蛋白1抗体
    SSX5    滑膜肉瘤X断点蛋白5抗体
    SPANX    /睾丸抗原11.3抗体
    SPON1    细胞外基质底物反应蛋白1抗体
    SIGLEC11    唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素11抗体
    Sema6A    Sema6A抗体
    S100-A9    S100A9抗体
    MCT4    单羧酸转运蛋4抗体
    NTR3    神经降压素受体3抗体（糖蛋白95）
    SOX10    转录因子SOX10抗体注意事项:
1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
试剂准备:
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
实验结果计算:
以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。