人肝脂肪酶ELISA检测试剂盒

人肝脂肪酶ELISA检测试剂盒使用说明书

仅供体外研究使用，不用于临床诊断!
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PK(Human pancreatickininogenase) ELISA Kit  人胰激肽原酶     96T
ACO-2(Human aconitase 2) ELISA Kit  人乌头酸酶2     96T
26S PSM(Human 26S proteasome) ELISA Kit  人26S蛋白酶体     96T
CDK-4(Human Cyclin-dependent kinase 4) ELISA Kit  人周期素依赖性激酶4     96T
PLAP(Human Placental alkaline pkosphatase) ELISA Kit  人胎盘碱性磷酸酶     96T
RTKs(Human receptor tyrosine kinase) ELISA Kit  人受体酪氨酸激酶     96T
MAPK(Human mitogen activited protein kinase) ELISA Kit  人丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶     96T
LZM(Human Lysozyme) ELISA Kit  人溶菌酶     96T
FAK(Human focal adhesion kinase) ELISA Kit  人黏着斑激酶     96T
sPL-A2(Human soluble Phospholipase A2) ELISA Kit  人可溶性磷脂酶A2     96T
DNase- I (Human deoxyribonuclease I ) ELISA Kit  人脱氧核糖核酸酶Ⅰ     96T
Arg(Human Arginase) ELISA Kit  人精氨酸酶     96T
NAP(Human neutrophilic alkaline phosphatase0 ELISA Kit  人中性粒细胞碱性磷酸酶     96T
ALK(Human anapastic lymphoma kinase) ELISA Kit  人间变性淋巴瘤激酶     96T
CKMB(Human cytokinin MB) ELISA Kit  人激动异构酶/细胞分裂素MB     96T
MLCK(Human myosin light chain kinase) ELISA Kit  人肌球蛋白轻链激酶     96T
GSTpi(Human glutathione S-transferases0 ELISA Kit  人谷胱甘肽硫转移酶pi基因     96T
GSTs(Human glutathione S-transferases) ELISA Kit  人谷胱甘肽S转移酶     96T
DUB(Human deubiquitinating enzyme) ELISA Kit  人泛素分解酶     96T
sPLA2(Human secreted phospholipase A2) ELISA Kit  人分泌型磷脂酶A2     96T
E3/UBPL(Human E3/ubiquitin-protein ligase) ELISA Kit  人泛素连接酶     96T
MCT(Human mast cell tryptase) ELISA Kit  人肥大细胞类胰蛋白酶     96T
DT(Human dopachrome tautomerase) ELISA Kit  人多巴色素异构酶     96T
E2/UBCE(Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme) ELISA Kit  人泛素结合酶     96T
PDI(Human protein disulfide isomerase) ELISA Kit  人蛋白质二硫键异构酶     96T
CAD(Human caspase activated deoxyribonuclease0 ELISA Kit  人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶     96T
Gamma-ECS(Human Gamma-glutamyl systeine synthetase) ELISA Kit  人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶     96T
E1/UBAE(Human E1/ubiquitin-activating enzyme) ELISA Kit  人泛素激活酶     96T
PP(Human Pepsin) ELISA Kit  人胃蛋白酶     96T
HK(Human Hexokinase) ELISA Kit  人己糖激酶     96T
PDH E1(Human pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA Kit  人酸脱氢酶E1     96T
GSK(Human glycogen synthase kinase) ELISA Kit  人糖原合成酶激酶     96T
Casp-9(Human Caspase-9) ELISA Kit  人胱天蛋白酶9     96T
人肝脂肪酶ELISA检测试剂盒Casp-3(Human Caspase 3) ELISA Kit  人胱天蛋白酶3     96T
NE(Human neutrophil elastase) ELISA Kit  人中性粒细胞弹性蛋白酶     96T
CA-2(Human carbonic anhydrase 2) ELISA Kit  人酶2     96T
ADAM8(Human A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA Kit  人解整合


样本处理及要求:
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

需要而未提供的试剂和器材:
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水
注意事项:
1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
试剂准备:
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
实验结果计算:
以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。