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独体—基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模拟 Akiko Koide and Shohei Koide

(Novagen) 衍生的独体表达质粒。它表达带有 His 标签的独体融合蛋白。独体基因含有一个 Arg 6 到 Thr 的突变，为了消除凝血酶的一个酶切位点，从一开始就已引入 [8]。 ( 3 ) pAS47: 在 FG-链套区含有一终止密码子的 PAS38 的衍生物（图 6.1A )。这是为了在构建 FG-链套区残基离散化的实物库时用作突变模板。 ( 4 ) JCFN : 编码独体 -基因 V III 融合蛋白的 JC- M13-88M 的衍生物。这是为独体多价展示用的 M13 噬菌体体系

生化实验室常用技术参数资料

bp 15.0 15bp 50bp 20.0 12bp 45bp 　　七、氨基酸的特性 氨基酸名称 三字母缩写 单字母缩写 质量 侧链电离的pHa值 结构式 丙氨酸（alanine） Ala A 89.09 　 精氨酸（arginine） Arg R 174.2 12.48 　 天冬酰氨（asparagine） Asn N 132.1 　 天冬氨酸（aspartic acid） Asp D 133.1 3.86 　 半胱

[转贴]包涵体纯化复性

冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。 5.化学处理法：有些动物细胞，例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠（SDS）、去氧胆酸钠等细胞膜破坏，细菌细胞壁较厚，可采用溶菌酶处理效果更好，我用的浓度一般为1mg/ml。 无论用哪一种方法破碎组织细胞，都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中，使大分子生物降解，导致天然物质量的减少，加入二异丙基氟磷酸（DFP）可以抑制或减慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入