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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 库存:
100
- 供应商:
上海莼试
- 规格:
50T
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
PRRSV 猪繁殖与呼吸综合征/猪蓝耳病病毒抗体
PDCD10 凋亡相关蛋白10抗体
PPM1F 钙调蛋白依赖性蛋白激酶磷酸酶抗体
PIM3 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PIM3抗体
PRMT5 组蛋白精氨酸甲基转移酶5抗体
PCDH11X 原钙粘附蛋白11X抗体
PCDH11Y 原钙粘附蛋白11Y抗体
PCDH12 原钙粘附蛋白12/血管内皮钙粘蛋白2抗体
PCDH17 原钙粘附蛋白17抗体
PCDH1 原钙粘附蛋白1抗体
PCDHA1 原钙粘附蛋白α1抗体
PCDHA3 原钙粘附蛋白α3抗体
PCDHA4 原钙粘附蛋白α4抗体
PCDHA5 原钙粘附蛋白α5抗体
PCDHA9 原钙粘附蛋白α9抗体
PCDHA7 原钙粘附蛋白α7抗体
PCDHA8 原钙粘附蛋白α8抗体
PRSS10 丝氨酸蛋白酶10抗体
PCDHA12 原钙粘蛋白12抗体
Prostatic Acid Phosphatase 前列腺酸性磷酸酶抗体
PAR6 缺陷性分配同源物α抗体
PCDHAC1 原钙粘蛋白1抗体
Prominin 2 造血干细胞抗原抗体CD133相关蛋白抗体
PTK6 酪氨酸蛋白激酶6/乳腺肿瘤激酶抗体
PCGF1 表观抑制因子Polycomb家族成员PCGFl蛋白抗体
PCDHAC2 原钙粘蛋白介导的PCDHαC2受体抗体
PAK4 小鼠抗p21激活激酶4抗体
PGC1 beta 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1β抗体
PGC1 alpha + beta 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α+β抗体
Prion protein PrP/CD230 朊病毒蛋白CD230抗体
Progestin Receptor Beta 孕激素受体β抗体
PTGFR 前列腺素F2a受体抗体PGF2αR
pan methyl Lysine 泛甲基赖氨酸抗体
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p53AIP1 p53调节凋亡诱导蛋白1抗体
PTRH2 Bcl-2转录抑制因子1抗体
PLSCR3 磷脂爬行酶3抗体
PARL 骨骼肌细胞线粒体膜蛋白PARL抗体
PNPT1 多核苷酸磷酸化酶蛋白抗体
PTK5 胃肠道相关酪氨酸激酶抗体
转基因品系大豆A2704-12 PCR试剂盒PCNP PEST含核蛋白抗体
phospho-p53BP1 磷酸化p53结合蛋白1抗体
PP1A 蛋白磷酸酶2Cα抗体
Phospho-Paxillin 磷酸化桩蛋白Paxillin抗体
PGP9.5 神经细胞胞浆蛋白9.5抗体
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验核酸提取 试剂 核酸扩增或转录——核酸扩增 试剂 产物检测试剂(有些使用全自动分析仪的PCR方法因其核酸扩增和检测同时完成,故无专门的产物检测试剂) 寡核苷酸引物和探针 缓冲液和dNTP 聚合酶 、逆转录酶等 更多详细内容: 马上下载
请教real time PCR的RT部分能否使用传统半定量RT-PCR试剂盒的反转录部分?
各位老师: 您们好!偶欲做几个基因的RT-PCR实验。偶先用传统的半定量两步法RT-PCR试剂盒(TaKaRa DRR019A)扩增了几个基因,并用该试剂盒反转录了不少cDNA。但还有2个基因偶打算用real time PCR法来扩增。拟采用TaKaRa DRR041S试剂盒。但是TaKaRa DRR041S试剂盒说明书上写的反转录步骤是使用另外一个单独的RT Reagents (TaKaRa DRR033A),得到cDNA再用TaKaRa DRR041S试剂盒扩增。但是仅一个RT
动物模型主要选用啮齿类小鼠作为受体,利用转基因技术将特定基因转移到小鼠体内,使其自发性发展具有关节炎特征的疾病。目前该模型发展有很多种类,其中人 TNF 转基因小鼠模型、K/BxN 转基因小鼠模型等都是研究分子靶向免疫制剂和发病机制的良好模型。 1. 人 TNF 转基因小鼠模型 TNF-α 转基因模型于 1991 年由 KOLLIAS 等[12]建立,通过修饰 C57BL/6 小鼠 3' 端的 UTR 区域,使其表达高水平 TNF-α,致自发性关节炎发生。 TNF-α 转基因模型小鼠 3~4 周时
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