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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温冷藏
- 保质期：
详见说明书
- 库存：
100
- 供应商：
上海莼试
- 规格：
50T
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水 处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
ETS1相关蛋白2抗体
副肿瘤综合症小脑变性相关蛋白抗体
食道癌相关基因4蛋白抗体
胞浆环氧化物水解酶抗体
红细胞生成素抗体
大肠杆菌脂多糖抗体
电子转移黄素蛋白β肽/黄素蛋白抗体
EFHA1蛋白抗体
EFHC1蛋白抗体
EFHC2蛋白抗体
EFHD1蛋白抗体
突触结合蛋白2抗体
表皮生长因子受体5抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体
乙酰基转移酶EID1抗体
雌激素受体相关蛋白3抗体
雌激素相关受体β抗体
甲基固醇羟化酶单加氧酶1抗体
上皮细胞膜蛋白2抗体
钠通道蛋白α ENaC
神经元，肌肉特异性烯醇化酶抗体
核苷酸焦磷酸酶2抗体
原癌基因CD39样蛋白4抗体
端粒酶结合蛋白EST1A抗体
组蛋白赖氨酸N-甲基EZH1抗体
上皮间质相互作用蛋白1抗体
雌激素诱导基因121蛋白抗体
内皮粘蛋白EMCN抗体
细胞骨架连接质膜蛋白抗体
内皮单核细胞激活肽2抗体
转录因子E2F8抗体
遗传性前列腺癌蛋白2抗体
真核翻译起始因子5抗体
微管相关蛋白EB家族3抗体
碱性鞘磷脂酶7抗体
转基因品系大豆G94-19探针法qPCR试剂盒上皮细胞微管相关蛋白7抗体
染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1/染色体区域稳定必需蛋白抗体
酪氨酸蛋白激酶A5受体抗体
对接蛋白EFS抗体
吞噬细胞运动蛋白1抗体
上皮细胞有丝分裂蛋白抗体
哺乳动物室管膜相关蛋白1抗体
内皮细胞粘附分子抗体
上皮细胞膜蛋白3抗体
肠道病毒71型/手足口病病毒抗体
膜蛋白EVC2抗体
Emerin蛋白抗体
转录因子ELF1抗体
酪氨酸蛋白激酶B3抗体
磷酸化酪氨酸蛋白激酶受体B1+B2抗体
酪氨酸蛋白激酶受体B1+B2+B3+B4抗体
肿瘤相关表面抗原RCAS1抗体
表皮生长因子样重复折叠1结构域蛋白3抗体
长链脂肪酸延长酶长ELOVL6抗体
酪氨酸蛋白激酶受体A6抗体
酪氨酸蛋白激酶受体A3抗体
酪氨酸蛋白激酶受体A7抗体
酪氨酸蛋白激酶受体B1抗体
长链脂肪酸延长酶ELOVL2抗体
长链脂肪酸延长酶长ELOVL5抗体
内皮分化型G蛋白偶联受体3抗体
发育相关蛋白ERCC6L抗体（乙醇致畸因子）
细胞外信号调节激酶5抗体
内皮细胞分化G蛋白偶联受体8抗体
神经细胞鸟苷酸置换因子NGEF抗体
磷酸化真核启动因子2α抗体
CD39样蛋白1抗体
空通气孔样蛋白2抗体
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
。现在已经涉及到生命科学研究的各个领域，比如基因的差异表达分析，SNP 检测，等位基因的检测，药物开发，临床诊断，转基因研究等。 在 Real-time qPCR 技术的发展过程中，定量 PCR 仪的发展起了至关重要的作用。1995 年，美国 PE 公司（已经并入 Invitrogen 公司）成功研制了 Taqman 技术，1996 年推出了首台荧光定量 PCR 检测系统，通过检测每个循环的荧光强度，通过 Ct 值进行数据分析。从而荧光定量 PCR 获得广泛应用。现在的定量 PCR 仪有 ABI
可增产约 10%。这些普通小麦转基因品系，以及转同效基因的硬质小麦品系，已获得加拿大管理部门的批准：“……，自 2007 年 1 月 4 日起， （ 加拿大）植物产品理事会的植物生物安全办公室 ( Plant Biosafety Office， PBO) 和动物健康与生产处伺养管理部门，授权自由地环境释放 CLEARFIELD 硬粒小麦品系 DW 2 、 DW 6 和 DW12，并批准硬质小麦项目 DW12 可用作牲畜伺料。任何由 DW 2、DW 6 和 DW12 品系中衍生出的品系也可以环境
已经涉及到生命科学研究的各个领域，比如基因的差异表达分析，SNP检测，等位基因的检测，药物开发，临床诊断，转基因研究等。在Real-time qPCR技术的发展过程中，定量PCR仪的发展起了至关重要的作用。1995年，美国PE公司（已经并入Invitrogen公司）成功研制了Taqman技术，1996年推出了首台荧光定量PCR检测系统，通过检测每个循环的荧光强度，通过Ct值进行数据分析。从而荧光定量PCR获得广泛应用。现在的定量PCR仪有ABI7000、7300、7500，7700、7900HT
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