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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 库存:
100
- 供应商:
上海莼试
- 规格:
50T
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
Phospho-TORC2 磷酸化CREB转录共激活因子TORC2抗体
TRP2 酪氨酸酶相关蛋白2抗体
TWIST protein TWIST蛋白抗体
Phospho-Tyrosine Hydroxylase 磷酸化酪氨酸羟化酶抗体
Topoisomerase I 拓普西异构酶Ⅰ抗体
TIN-Ag 肾小管间质肾炎抗原抗体抗体
TMEM176A 跨膜蛋白176A抗体
TMEM176A 跨膜蛋白176A抗体
TBX3 转录因子Tbx3抗体
tinagl1 tinagl1抗体
TRPV5 辣椒素受体5抗体
TRA1 variant 肿瘤排斥抗原抗体gp96 1 变异体抗体
TFPI/LACI 组织因子途径抑制剂抗体
TRIM47 星形细胞瘤高表达蛋白抗体
TUBB5 微管蛋白β5抗体
TRIM24 转录中介因子Tif1α抗体
KAP1 转录中介因子Tif1β抗体
Phospho-TIF1 beta 磷酸化转录中介因子Tif1β抗体
Tyk2 非受体酪氨酸蛋白激酶2抗体
TIF1 gamma 转录中介因子Tif1γ抗体
TLK1 调节染色体组装激酶1抗体
TCTP 翻译控制肿瘤蛋白抗体
TSP50 肿瘤/睾丸抗原抗体20抗体
TIMM17A 线粒体内膜转位酶抗体
RNF9 环指蛋白9抗体
TIMP-1 金属蛋白酶组织抑制因子-1抗体
Tex19A 睾丸表达蛋白19A抗体
TASK 3 酸敏感性钾离子通道蛋白抗体
TSLP 胸腺基质淋巴细胞生成素-1抗体
TAGL2 细胞骨架相关蛋白2抗体
TCEB3 转录延伸因子3抗体
TP53I8 肿瘤蛋白p53诱导蛋白8
TCERG1 转录延伸调节蛋白1抗体
Torsin B 扭转蛋白B抗体
TTC8 巴尔得-别德尔综合征相关蛋白8抗体
TAS2R7 味觉受体蛋白家族2亚基7抗体
T2R50 味觉受体蛋白家族2亚基50抗体
TWSG1 扭转原肠胚形成同源蛋白1抗体
Tuftsin Tuftsin蛋白抗体
TMEM161A 跨膜蛋白161A抗体
TTC23 宫颈癌原癌基因8抗体
TNFAIP8 肿瘤坏死因子α诱导蛋白8抗体
TBCD4 TBC结构域TBCD4蛋白抗体
TRIP 肿瘤坏死因子受体相互作用蛋白抗体
TRAF4 肿瘤坏死因子受体相关蛋白4抗体
TCTN1 结构蛋白家族1抗体
TFF1 乳腺癌雌激素诱导蛋白抗体
Tmem18 跨膜蛋白18抗体
phospho-TRIM25 磷酸化雌激素反应指状蛋白抗体
phospho-TUBB3 磷酸化神经细胞特异性微管蛋白抗体
TRPM7 瞬时受体电位离子通道蛋白7抗体
TRPM8 “冷”蛋白TRPM8抗体
TRPM3 瞬时受体电位离子通道蛋白3抗体
TRIM25 雌激素反应锌指蛋白抗体
Twist2 TWIST蛋白2抗体抗体
phospho-TRIM25 磷酸化雌激素反应指状蛋白抗体
phospho-TERT 磷酸化端粒酶逆转录酶抗体
phospho-TSC1 磷酸化结节性硬化症蛋白1抗体
Phospho-TSC2 磷酸化结节性硬化蛋白抗体
Phospho-TSC2 磷酸化结节性硬化蛋白抗体
Phospho-TSC2 磷酸化结节性硬化蛋白抗体
Phospho-TSC2 磷酸化结节性硬化蛋白抗体
Phospho-TSC2 磷酸化结节性硬化蛋白抗体
TNFR1 肿瘤坏死因子受体1抗体
TP53I13 肿瘤蛋白p53诱导蛋白13
TMEFF2 增生性息肉蛋白1抗体
TMEM166 跨膜蛋白166抗体
TM9SF1 跨膜蛋白超家族9-1抗体
CD70 肿瘤坏死因子配体超家族成员7抗体
TCTN3 结构蛋白家族3抗体
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
玉米内标准adhl基因染料法PCR试剂盒储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验(Adhl)的第一个内含子(intron 1)对外源基因表达有明显增强作用,该基因的其他内含子(例如intron8,intron9)也有一定的增强作用。后来,Vasil等也发现玉米的果糖合成酶基因的第一个内含子能使CAT表达水平提高10倍。水稻肌动蛋白基因的第三个内含子也能使报道基因的表达水平提高2~6倍。至今对内含子增强基因表达的机制不不清楚,但一般认为可能是内含子的存在增强了mRNA的加工效率和mRNA稳定性。Tanaka等人的多项研究表明,内含子对基因表达的增强作用主要发生在单子叶植物,在双子
无论是对遗传病(如地中海贫血和血友病)、传染病(如肝炎和艾滋病)或肿瘤进行基因诊断,还是研究药物对基因表达水平的影响,或者监控药物和疗法的治疗效果,定量PCR技术都可以发挥很大作用。定量PCR技术的最新进展是实时荧光定量。该技术借助于荧光信号来检测PCR产物,一方面提高了灵敏度,另一方面还可以做到PCR每循环一次就收集一个数据,建立实时扩增曲线,准确地确定CT值,从而根据CT值确定起始DNA拷贝数,做到了真正意义
摘 要: RACE是一种快速克隆cDNA末端的方法,目前, 该方法被广泛应用于未知碱基序列基因的克隆,尤其是SMART RACE技术更为人们所青睐。本文总结了我们实验室用SMART RACE技术克隆基因的一些心得体会,希望对用RACE方法克隆基因的同行有些帮助。 关键词: RACE; RNA提取; 兼并引物 中图分类号 :Q75 文献标识码 :A Some Suggestions on Gene Cloning by RACE-PCR Abstacts:RACE
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