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TSINGKE
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TA克隆
TA克隆
TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)把PCR片断与T载体DNA连接起来的方法。 通过PCR的方法扩增目的基因片断,往往由于缺失或其他原因无法获得准确的DNA序列,通常需要通过TA克隆的方法,重组到T-载体中,使用通用引物测出准确DNA序列。 由于在PCR过程中,使用的DNA聚合酶不同,往往分为2种情况:
(1)使用Taq酶,Taq酶可以在扩增产物的3末端加上A,因此PCR产物回收纯化后可以和T载体直接连接。
(2)使用高保真的DNA聚合酶,如pfu酶,由于其不能在扩增产物的3末端加上A,得到的DNA序列为钝端,因此,需要在回收纯化后进行加A的过程,通常是以PCR回收产物为模板,加上一定量的普通Taq酶和反应液,加入dATP(或dNTP), 72℃ 10分钟,然后将加A产物直接用于TA连接。
2.使用我们公司pClone007 Vector Kit进行克隆。
3.测序及结果分析。
备注:克隆费用是针对100-3000bp制定,如超过此范围,具体价格请垂询
2.使用我们公司pClone007 Vector Kit进行克隆。
3.测序及结果分析。
技术服务咨询13370102212
TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)把PCR片断与T载体DNA连接起来的方法。 通过PCR的方法扩增目的基因片断,往往由于缺失或其他原因无法获得准确的DNA序列,通常需要通过TA克隆的方法,重组到T-载体中,使用通用引物测出准确DNA序列。 由于在PCR过程中,使用的DNA聚合酶不同,往往分为2种情况:
(1)使用Taq酶,Taq酶可以在扩增产物的3末端加上A,因此PCR产物回收纯化后可以和T载体直接连接。
(2)使用高保真的DNA聚合酶,如pfu酶,由于其不能在扩增产物的3末端加上A,得到的DNA序列为钝端,因此,需要在回收纯化后进行加A的过程,通常是以PCR回收产物为模板,加上一定量的普通Taq酶和反应液,加入dATP(或dNTP), 72℃ 10分钟,然后将加A产物直接用于TA连接。
实验流程
您需要提供的信息
写明需克隆片段的信息:样品名称,片段大小,是否纯化,产物是否带有“A”尾。送样要求
| 样品类型 | 片段长度(bp) | 浓度 | 体积 |
| PCR已纯化 | 100~3000 | ≥10 ng/ul | ≥10 ul |
| PCR未纯化 | 100~3000 | ≥30 ng/ul | ≥30 ul |
我们可以提供的服务
1.PCR产物鉴定及纯化。2.使用我们公司pClone007 Vector Kit进行克隆。
3.测序及结果分析。
结果展示
服务价格
| 项目内容 | 价格 |
| TA克隆 | 300元/样本 |
| 测序 | 同常规测序 |
我们可以提供的服务
1.PCR产物鉴定及纯化。2.使用我们公司pClone007 Vector Kit进行克隆。
3.测序及结果分析。
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