TSBL21（DE3）pLysS Chemically Co
mpetent Cell/感受态系列/低本底高效表达感受态，转化效率＞10^8 cfu/μg，可用于毒性蛋白的表达/擎科生物TSINGKE- ￥300
- 擎科生物
- 武汉
- TSC-E05
- 2026年01月13日
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- 保存条件：
-83~-78℃保存6个月
- 英文名：
TSBL21（DE3）pLysS Chemically Competent Cell
- 库存：
充足
- 供应商：
北京擎科生物科技股份有限公司
- 规格：
10×100 µL
低本底高效表达感受态，转化效率＞108 cfu/μg，可用于毒性蛋白的表达
TSBL21（DE3）pLysS菌株衍生于大肠杆菌BL21系列菌株，包含一个低拷贝的氯霉素抗性质粒pLysS（可与pET28a、pGEX4T的等常见质粒兼容），可少量表达T7溶菌酶，在未诱导时，该酶能与T7 RNA聚合酶结合并抑制其功能，当加入IPTG诱导时，T7 RNA聚合酶大量表达，细胞中少量的T7溶菌酶不会对大量存在的T7 RNA聚合酶产生较大抑制。因此该质粒就可以降低外源基因的泄露表达，也不干扰IPTG诱导表达，相对于BL21（DE3）可以降低90%的本底表达，可用于毒性蛋白的表达。本产品经优化的感受态制备工艺制备而成，使用pUC19质粒DNA检测，转化效率可达1×108 cfu/µg。
【产品特点】
蛋白表达能力优异；
转化效率大于 1×109 cfu/µg；
适合毒蛋白表达。
【基因型】
F- ompT hsdS(rB- mB-) gal dcm (DE3)pLysS Camr
【产品组成及保存】
-83~-78℃保存6个月。
| 组分 | 规格 |
| TSBL21（DE3）pLysSChemically Competent Cell | 10 ×100 µL |
| pUC19(control vector) | 10 µL(10 pg/µL) |
【操作流程】
加入目的 DNA（质粒或连接产物），轻轻混匀后进行如下步骤：
【注意事项】
感受态细胞在冰上融化；
实验操作轻柔；
请勿反复冻融；
转化后涂板，平板不可加入氯霉素，否则双抗生素条件下，细菌生长十分缓慢，但诱导表达摇菌时，应加入双抗，防止氯霉素质粒丢失（此时生产速度正常）。
【问题讨论】
Q1：TSBL21（DE3）pLysS是如何表达毒性蛋白的？
A1：TSBL21（DE3）pLysS来源于BL21，携带pLysS质粒，具有氯霉素抗性。pLysS含有表达T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达，适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
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文献和实验1. 一定要用干冰运输。 3 2. 不立即使用的感受态细胞请在-80℃下保存（融化后的感受态细胞不能再冻结保存）。 3. 转化时请使用传热性能较好的试管。一般的1.5 ml微型离心管也可使用，但转化效率会有所下降（此时请在使用方法5.的42℃下放置60秒）。 4. 对100 μl的感受态细胞，用于转化的质粒DNA量请控制在10 ng以下，并保证DNA溶液的体积在20 μl以下。否则会影响转化效率。
1．制备感受态细胞和转化时，应特别注意哪些环节。 2．转化效率的计算：转化效率是指每微克质粒DNA转化细胞产生的转化子数目，请列表表示你的转化结果并算出转化率（列出计算公式）。你所做实验的转化效率（正对照）是多少？ 如果过低（如低于104 cfu/μg DNA），请分析可能的原因。需要注意的是，连接产物的转化效率是非常低的，为什么？ 3．若实验出现不正常的结果，请分析原因。 附录
(DE3)表达不成功的话可以换Rosetta系列菌株，它能够由一种氯霉素抗性的、与pET 相容的质粒提供AUA，AGG，AGA，CUA，CCC和GGA 的tRNA。所以这类菌株能够明显改善大肠杆菌中由于稀有密码子造成的表达限制。有时不明原因的表达蛋白截短（比预期的分子量要小很多）也可能是由于稀有密码子造成的。另外一种可能是不严谨的本底表达产物抑制。没有发现原则性错误之后，最简单、快捷的就是改变一下表达温度、IPTG浓度。低温、较长时间的表达有利于蛋白稳定、融合表达，低浓度的IPTG可以减少化学
