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NEB 10-beta E. coli 感受态细胞 NEB

10-beta Competent E. coli
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  • #C3019H
  • 2026年01月10日
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    相关产品及可单独出售组分
    NEB 10-beta E.coli 电转级感受态细胞
    #C3020K 6 x 0.1 ml . . . . . ¥1,929
    可单独出售的组份:
    SOC Outgrowth 培养基
    #B9020S 4 x 25 ml . . . . . . . ¥669


    ♦可克隆大质粒和 BACs
    ♦ DH10BTM 衍生物
    ♦无动物来源产品
    ♦ 抗 T1 噬菌体感染(fhuA2)


    概述
    E. coli 感受态细胞,广泛应用于多种高效级转化。


    基因型
    araD139 Δ(ara-leu)7697 fhuA lacX74 galK (Ø80Δ(lacZ)M15) mcrA galU recA1 endA1 nupG rpsL ( StrR )Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)


    特性
    • 可高效转化真核来源的甲基化 DNA 或未甲基化 PCR、cDNA 或其它来源的 DNA
    • 无需 IPTG 可进行蓝/白斑筛选
    • 缺失非特异性核酸内切酶 I(endA1 )活性,可用于制备高质量质粒
    • 可减少克隆 DNA 的重组反应(recA1


    转化效率
    高效级:1–3 x 109 cfu/μg pUC19 DNA
    电转级:2–4 x 1010 cfu/μg pUC19 DNA

    未被转化的细胞需要检测抗Ø80噬菌体感染的能力,这是检测抗T1噬菌体感染能力的标准检测法。此外,未转化细胞还要检测其抗链霉素抗性以及对氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素和四环素的敏感性。使用pUC19质粒通过对α−半乳糖基因的β-互补分析显示:这些细胞也适宜进行蓝/白斑筛选。


    随产品提供
    SOC Outgrowth 培养基*     (室温贮存)

    0.025 ml,50 pg/μl pUC19 对照 DNA     (–20°C贮存)

    *C3019H 提供20 ml的SOC,而C3019I 则提供25 ml的SOC


    注意事项
    感受态细胞应贮存于–80°C,一旦融化,就不能被冻存。–20°C贮存会显著降低其转化效率。只要温度高于–80°C,即使未被融化,细胞转化效率也会降低为零。

     
     
     
     
     
     
     
     
     
    不同大小质粒的转化效率: 化学法制备的NEB10-beta感受态细胞比NEB5-alpha更适合于大质粒的转化。如上图所示,质粒越大,两种感受态细胞转化效率的差值就越大。


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