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上海研谨生物
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油红O染色实验代做服务
油红0染色简介:
油红0脂肪染色法是指在日常病理诊断和科研工作中为了显示组织内的脂肪常采用油红0进行染色的方法,油红0为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色。
油红0染色实验意义:
正常情况下,除脂肪细胞外其他细胞内-般不见或仅见少量脂滴。在病理状态下如这些细胞中出现脂滴或脂滴明显增多,特别是在心、肝.肾等实质器官发生脂肪变性时,胞浆内出现大小不一的空泡, 这时常需鉴别空泡性质,用脂肪染色来区分是脂肪变性还是水样变性或糖原贮留。在动脉粥样硬化时,内皮细胞下的脂质沉著,用脂肪染色能将脂质清晰地显示出来。由脂肪组织病变所弓|起的脂肪栓塞可用脂肪染色显示栓子内的脂质,从而确诊脂肪栓塞。用于肿瘤组织的鉴别诊断,由脂肪组织所发生的肿瘤在与其他组织来源的肿瘤相区分时,可以借助脂肪染色,脂肪组织所发生的肿瘤,脂肪染色为阳性。并可根据所显示的细胞形态特点与类似肿瘤进行鉴别,肾透明细胞癌与肾上腺瘤,卵巢纤维瘤与卵泡膜细胞瘤。皮脂腺瘤与鳞状细胞癌的鉴别诊断有意义。
实验步骤:
1.固定:将冰冻切片复温干燥10min;细胞爬片4%多聚甲*醛固定15min,PBS漂洗3次, 5min/次。
2.染色:入油红0工作液孵育10-15min;细胞爬片破膜10-15min, PBS漂洗3次,5min次, 入油红工作液37°C染色1-2h。
3.分化: 75%酒精分化2s,水洗1min。
4、复染细胞核: Harris苏木素复染1-2min左右, 自来水洗,1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗,氨*水返蓝,流水冲洗。
5、封片:用纸巾吸去周边水分,甘油明胶封片。
实验结果:
脂滴呈橘红色至鲜红色:细胞核呈深蓝色。
实验技巧:
1.油红0是对脂类物质进行染色,石蜡切片在处理过程中脂类物质无法保存,所以石蜡切片不能进行油红0染色。
2.油红0染液使用一段时间后,染出的脂滴颜色会偏黄,此时就需要更换染液。
3.油红染色时,动作要轻,因为脂滴易移位,并且在封片时应避免盖玻片滑动。
实验代做服务:
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文献和实验油红 O属于偶氮染料,是很强的脂溶剂和染脂剂,与甘油三酯结合呈小脂滴状。脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类,它在脂类中的溶解度比在溶剂中大。当组织切片置人染液时,染料则离开染液而溶于组织内的脂质(如脂滴)中,使组织内的脂滴呈橘红色。 一、油红O染液的配制 1.油红O 1g 异丙醇 100ml 2.油红O 足量 异丙醇 100ml 配成油红O饱和溶液,使用时以油红O饱和液一份加蒸馏水两份,过滤后使用。 二、染色程序 1.切片用甲醛―钙
背景:真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。与传统的EMSA技术相比,染色质免疫沉淀技术(CHIP)能真实完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白,是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用的最佳方法。原理:是在活细胞状态下以甲醛固定蛋白质-DNA复合物,超声将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后加入目的蛋白抗体,通过抗体沉淀靶蛋白-DNA复合物,通过洗脱的方法得到富集的靶蛋白-DNA复合物,特异性地富集目的
成正比。 目前 ELISA 法应用 1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。 2、研究抗酶抗体的合成。 3、显现微量的免疫沉淀反应。 4、定量检测体液中抗原或抗体成份。 小优 ELISA 实验检测服务 优宁维公司提供空白板,buffer 缓冲液等 客户只需提供样本 小优结果形式:统计结果,实验流程,全程提供疑问解答 优宁维是专业的抗体公司,我们的实验服务团队是由博士后领衔的团队。我们实验室拥有先进的实验仪器平台,服务的价格是实惠亲民
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