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Cloning 无缝克隆试剂盒

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  • SCNP-10/50
  • 2026年02月08日
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    Catalog NO.SCNP-10/50
    产品规格: 10次反应、50次反应
    试剂保存:-20℃保存,不宜反复冻融



    产品简介:
    无缝克隆试剂盒提供了一种新颖、高效、快速的基因克隆方法,只需DNA插入片段末端与载体末端具有15 - 20个同源碱基序列,就可以在载体的任意位点完成一个或多个目标DNA片段的克隆重组,而不需要任何限制性内切酶和连接酶。

    产品特色:

    1.灵活的克隆位点:任何载体的任意位置。
    2.快速简便:30分钟完成载体构建。
    3.精确:不会增加任何额外的程序。
    4.效率高:高达90%阳性克隆率。


    适用范围:


    产品细节图片1

    操作流程:

    1.采用酶切或PCR扩增方法将载体线性化。
    2.使用设计好的引物进行目的DNA片段的PCR扩增。
    3.将目的DNA片段和线性化载体以摩尔比2:1加到试管中进行重组反应:


    产品细节图片2
    4.混匀后在42℃孵育30分种,然后转移到冰上。
    5.使用5 μl反应液转化到感应态细菌中。


    PCR引物设计:

    1.引物的质量对重组反应的成功率有很大影响,因此强烈建议使用HPLC或PAGE纯化的引物。
    2.引物设计时应该在遵循常规引物设计原则的基础上,把15-20个同源碱基序列导入引物。 根据线性化载体末端的不同类型进行如下引物设计:



    产品细节图片3



    产品细节图片4


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