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Catalog NO.SCOP-100(P)
产品简介:
Plant D irect P CR是一种新颖的核酸释放和扩增试剂盒,包含裂解液(Plant Lysis Buffer)PCR预混液(2× Pla nt Dir ect PCR Sup ermix)。各类植物样品经过裂解液处理后可直接用于PCR 反应,无需提取其DNA。而且,经优化后的PCR 预混液可有效地消除一些抑制剂对
PCR 反应的干扰。

产品特色:
1.简单快速 : DNA 释放仅需15 min 左右。
2.无需提取DNA : 节省时间,成本,劳动。
3.易于自动化:与高通量的基因工作流程兼容。
4.多重PCR : 可以使用多重PCR 引物 , 扩增多个DNA 序列。
5.缩短实验时间,降低基因检测成本。
操作流程:
方法一:
1.取1~5 mg 植物样本放入1.5 ml 的管子中,加入50 μl 裂解液 , 并用1 ml 的枪头捣碎
植物样本,大约30 下即可。
2.静置10 分钟,离心1 min,取1~3 μl 上清液直接加入25 μl (2X Plant Direct PCR
Supermix) 预混液中。PCR 反应体系如下:

方法二:
1.取1~5 mg植物样本放入1.5 ml的管子中,加入50 µl裂解液, 并用1 ml的枪头捣碎植物样本,大约30下即可。
2.90~100 ℃水浴裂解样本5~10 min,漩涡混合均匀。然后将管子置于4 ℃冰上。用 50 µl TE或H2O稀释裂后的样本。
3.离心1 min以沉淀组织碎片。取1~3 µl上清液直接加入25µl (2X Plant Direct PCR Supermix) 预混液中。PCR反应体系如下:

PCR循环:

注意事项:
1.PCR反应需使用该试剂盒配套的 Plant Direct PCR 预混液。 若使用其他品牌的PCR预混
液不能保证反应正常进行。
2.处理后的样品应在1小时内使用,或在-20℃~-80℃最长保存1个月(不宜反复冻融)。
3.作为模板的裂解液用量最好控制在PCR反应体系的10%以内, 以确保PCR在有效的pH缓
冲范围进行。
4.若90~100℃ 温浴样品5~10 min,可有效地提高核酸的释放。另外,通过延长室温裂
解过程,也可实现核酸的充分释放。
5.除标准PCR应用,Plant Direct PCR 试剂盒也可用于多重PCR。
该产品仅限于科研用途,而不适用于临床诊断、治疗等其他特殊途。
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文献和实验) (3)neutralize by adding 40 ml 0.25 N HCl and 20 ml 0.5 M Tris-HCl pH 8.0, 0.25% (v/v) Igepal CA-630 (4)boil for another 2 min (5)use directly for PCR or store at 4°C for up to several weeks (6)if stored at 4°C boil again for 2 min before the PCR 2.Remarks
1.材料和方法Access RT-PCR System 试剂盒 (A1250):Promega 公司产品。500u AMV Rev 目的基因 se Transcriptase, 5u/ul500u Tfl DNA Polym 目的基因 ase, 5u/ul1 ml AMV/Tfl 5×Reaction Buff 目的基因1.25 ml MgSO4, 25 mM100ul dNTP Mixture, 10 mM each of dATP, dCTP, dGTP and dTTP50
Detection and Quantification of Plant Viruses by PCR
The polymerase chain reaction (PCR) is a technique that enables the specific amplification and hence detection of target DNA sequences from complex mixtures of nucleic acid. A combination of short, specific primers and thermostable DNA
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