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RT-PCR试剂盒 一步法

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      SuperScript® One-Step RT-PCR System with Platinum® Taq DNA Polymerase

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      上海善然生物科技有限公司

    描述The SuperScript® One-Step RT-PCR System with Platinum® Taq DNA Polymerase is designed for the convenient, sensitive, and reproducible detection and analysis of RNA molecules by RT-PCR. Components for both cDNA synthesis and PCR are combined in a single tube, using gene-specific primers and target RNAs from either total RNA or mRNA. Reverse transcription automatically follows PCR cycling without additional steps.

    Using the SuperScript® One-Step System
    The system consists of two major components: RT/ Platinum® TaqMix and 2X Reaction Mix. The RT/ Platinum® Taq Mix contains a mixture of SuperScript® II Reverse Transcriptase and Platinum® TaqDNA Polymerase for optimal cDNA synthesis and PCR amplification. SuperScript® II RT is a modified version of Moloney Murine Leukemia Virus (M-MLV) RT, engineered to reduce RNase H activity and increase thermal stability. Platinum® Taq DNA polymerase is Taq DNA polymerase complexed with a proprietary antibody that inhibits polymerase activity at ambient temperatures. The antibody is denatured and polymerase activity is restored during the denaturation step in PCR cycling at 94°C. This provides an automatic "hot start" in PCR, increasing sensitivity, specificity, and yield. The 2X Reaction Mix consists of a proprietary buffer system optimized for reverse transcription and PCR amplification, Mg2+ optimized for universal use, deoxyribonucleotide triphosphates, and stabilizers. This convenient 2X format allows further addition of template and primer at any desired concentration.
    For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
    Figures
    Component list. Sensitivity of the SuperScript® One-Step RT-PCR System with Platinum® Taq DNA Polymerase.
    规格
    PCR Method:1-Step RT-PCRReverse Transcriptase:SuperScript® IIPolymerase:Platinum® Taq DNA PolymeraseHot Start:Built-In Hot StartSample Type (General):RNAProduct Size:25 reactionsDetection Method:Gel ElectrophoresisShipping Condition:Wet IceFinal Product Size(s):3 kb or lessPrimer-Probe Compatibility:Unlabeled Oligos

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    相关实验
    • PCR和RT-PCR

      检测或定量。另外,这项技术还可以用来检测基因表达差异或不必构建cDNA文库克隆cDNA。RT-PCR比其他包括Northern印迹、RNase保护分析、原位杂交及S1核酸酶分析在内的RNA分析技术,更灵敏,更易于操作。 RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使用逆转录酶,以随机引物、oligo(dT)或基因特异性的引物(GSP)起始。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在最佳条件下进行。cDNA的合成首先在逆转录缓冲液中进行

    • 推荐:PCR与RT-PCR技术

      基因表达差异或不必构建cDNA文库克隆cDNA。RT-PCR比其他包括Northern印迹、RNase保护分析、原位杂交及S1核酸酶分析在内的RNA分析技术,更灵敏,更易于操作。 RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使用逆转录酶,以随机引物、oligo(dT)或基因特异性的引物(GSP)起始。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在最佳条件下进行。cDNA的合成首先在逆转录缓冲液中进行,然后取出1/10的反应产物进行PCR。在一步法

    • RT-PCR 引物的选择

      随机引物 适用于长的或具有发卡结构的 RNA。适用于 rRNA、mRNA、tRNA 等所有 RNA 的反转录反应。主要用于单一模板的 RT-PCR 反应。 Oligo dT 适用于具有 PolyA 尾巴的 RNA。(原核生物的 RNA、真核生物的 Oligo dT rRNA 和 tRNA 不具PolyA 尾 巴。)由于 Oligo dT 要结合到 PolyA 尾巴上,所以对 RNA 样品的质量要求较高,即使有少量降解也 会使全长 cDNA 合成量大大减少。 基因特异性引物 与模板序列互补

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