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- XG-Y7771
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- 2025年07月12日
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详见说明书
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
4°C保存
- 规格：
100T/盒
准备工作：
固定液：4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加氯化钠17.6g，柠檬酸三钠(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加氯化钠30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
产品名称 VEGF-B mRNA原位杂交试剂盒100T/盒
规格 100T/盒
特异性 人、大鼠、小鼠
标记方式 3’—尾段标记
保存条件 4°C保存一年
试剂盒内容 1.VEGF-B 寡核苷酸探针杂交液 2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.胃蛋白酶（×10;Pepsin） 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
注意事项：
VEGF-B mRNA原位杂交试剂盒100T/盒由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。
下列是公司正在热销的产品：
人胚胎肺成纤维细胞;WI-38三醋酸甘油酯(>98%,BR)Glycerol triacetate质量规格：>98%,BR
PIEC细胞，猪髋动脉内皮细胞 人结肠癌细胞,T84细胞 CM-H061人肾小球内皮细胞完全培养基100mL甘氨酸钠(>98%,BR)Glycine salt质量规格：>98%,BR
大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1乙醇酸(>98%,BR)Glycolic acid质量规格：>98%,BR
RK1 Others Human 人 kA / RK1 人细胞裂解液 (阳性对照) 硬脂酸单甘油酯(>98%,BR)GMS, glycerol monostearate质量规格：>98%,BR
心肌细胞Many types of cells包装：5 ×105方(1ml)氯化金Gold (III) chloride tetrahydrate质量规格：BC
CM-R006大鼠肺成纤维细胞完全培养基100mL牛磺脱氧胆酸钠Taurodeoxycholic acid salt质量规格：>97%,BR
5637, 人膀胱癌细胞 蓖麻蚕卵细胞,NISE-Sacy-12细胞 TE 353.Sk(人正常皮肤细胞)rU亚1酰胺单体rU Phosphoramidite质量规格：>98%,BR
小鼠肾足细胞;Mouse podocyteBz-rA亚1酰胺单体Bz-rA Phosphoramidite质量规格：>98%,BR
TNFRSF17 Others Mouse 小鼠 BCMA / TNFRSF17 人细胞裂解液 (阳性对照) i-bu-rG亚1酰胺单体i-bu-rG Phosphoramidite质量规格：>98%,BR
人导管癌细胞;ZR-75-1PF299804（EGFR抑制剂）Dacomitinib质量规格：>99%,可用于细胞培养
人结肠平滑肌细胞cDNAHCSMC cDNA无水碳酸钠质量规格：AR,≥99.8% carbonate anhydrous
NCL-H460细胞，非小细胞肺癌 人肺动脉内皮细胞,HPAEC细胞 肝动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)D-果糖质量规格：>99%,BRD-Fructose
犬肾细胞;MDCK(NBL-2)核黄素1酸钠水合物质量规格：核黄素73.0 ~79.0%Riboflavin 5'-monophosphate salt hydrate
TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴化乙锭溶液，10 mg/ml质量规格：>98%,BREB, Ethidium bromide stock solution, 10 mg/ml
CL-0231TE-1(人食管癌细胞)5×106cells/瓶×2APMSF(进分)质量规格：进分,sigma A6664p-APMSF, Hydrochloride
VEGF-B mRNA原位杂交试剂盒100T/盒Raji人Butt's瘤细胞 Raji human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS葡聚糖T7shēng huà shì jì容量：50毫克
FGF12 Protein Canine 重组狗 FGF12 蛋白4-肖基-L-本炳安醋 4-nitno-3-phqnyl-L-clcninq 949-99-2
AML-193(人急性单核细胞白血病单核细胞) 5×106cells/瓶×2 人神经细胞HN尿酸酶shēng huà shì jì容量：25克
人肾小球内皮细胞cDNAHRGEC cDNACOOMASSIEBRILLIANTBLUEG-250考马斯亮兰G-250超级蓝色至红色结晶粉末RTsigma
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1
2027-06-4
化铵;化铔AMMoniuM iodide
特点：
1. 产品仅供科研安全、快速、重复性好；
2. 特异性100%，灵敏度超过90%；
3. 探针性能稳定，低温保存一年以上；
4. 荧光信号强，结果判定直观可靠；
5. 操作简单，定位精准，无实验污染。
固定液：4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加氯化钠17.6g，柠檬酸三钠(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加氯化钠30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
| 产品名称 | VEGF-B mRNA原位杂交试剂盒100T/盒 |
| 规格 | 100T/盒 |
| 货号 | XG-Y7771 |
规格 100T/盒
特异性 人、大鼠、小鼠
标记方式 3’—尾段标记
保存条件 4°C保存一年
试剂盒内容 1.VEGF-B 寡核苷酸探针杂交液 2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.胃蛋白酶（×10;Pepsin） 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
注意事项：
VEGF-B mRNA原位杂交试剂盒100T/盒由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。
下列是公司正在热销的产品：
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PIEC细胞，猪髋动脉内皮细胞 人结肠癌细胞,T84细胞 CM-H061人肾小球内皮细胞完全培养基100mL甘氨酸钠(>98%,BR)Glycine salt质量规格：>98%,BR
大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1乙醇酸(>98%,BR)Glycolic acid质量规格：>98%,BR
RK1 Others Human 人 kA / RK1 人细胞裂解液 (阳性对照) 硬脂酸单甘油酯(>98%,BR)GMS, glycerol monostearate质量规格：>98%,BR
心肌细胞Many types of cells包装：5 ×105方(1ml)氯化金Gold (III) chloride tetrahydrate质量规格：BC
CM-R006大鼠肺成纤维细胞完全培养基100mL牛磺脱氧胆酸钠Taurodeoxycholic acid salt质量规格：>97%,BR
5637, 人膀胱癌细胞 蓖麻蚕卵细胞,NISE-Sacy-12细胞 TE 353.Sk(人正常皮肤细胞)rU亚1酰胺单体rU Phosphoramidite质量规格：>98%,BR
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NCL-H460细胞，非小细胞肺癌 人肺动脉内皮细胞,HPAEC细胞 肝动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)D-果糖质量规格：>99%,BRD-Fructose
犬肾细胞;MDCK(NBL-2)核黄素1酸钠水合物质量规格：核黄素73.0 ~79.0%Riboflavin 5'-monophosphate salt hydrate
TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴化乙锭溶液，10 mg/ml质量规格：>98%,BREB, Ethidium bromide stock solution, 10 mg/ml
CL-0231TE-1(人食管癌细胞)5×106cells/瓶×2APMSF(进分)质量规格：进分,sigma A6664p-APMSF, Hydrochloride
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FGF12 Protein Canine 重组狗 FGF12 蛋白4-肖基-L-本炳安醋 4-nitno-3-phqnyl-L-clcninq 949-99-2
AML-193(人急性单核细胞白血病单核细胞) 5×106cells/瓶×2 人神经细胞HN尿酸酶shēng huà shì jì容量：25克
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特点：
1. 产品仅供科研安全、快速、重复性好；
2. 特异性100%，灵敏度超过90%；
3. 探针性能稳定，低温保存一年以上；
4. 荧光信号强，结果判定直观可靠；
5. 操作简单，定位精准，无实验污染。
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【求助】求助VEGF and Tenascin and Aggrecan
jellyfish102 Tenascin和Aggrecan与VEGF之间是什么关系，Tenascin和Aggrecan是VEGF的下游基因吗，课题需要，请专家答疑，谢谢。 chuckdouble 不是专家的个人意见 首先, 是否***因子是***因子的上游或下游 这种问题, 需要具体到哪种模型, 哪种细胞, 哪种亚型. 不然一般不存在答案. tenascin 是个家族, 有 TNC
Science：延长小鼠寿命 50%！提升 VEGF 水平可
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