- ￥840
- 汉恒生物
- HB-infusion-20
- 2026年03月23日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
20T
一、产品简介
HB-infusionTM无缝克隆试剂盒是一种新型、快速并且高效的Gibson Assembly DNA定向克隆技术，可以在任意载体的任意位置一次插入多个目的基因片段。HB-infusionTM无缝克隆试剂盒操作极其简单，仅需在载体的克隆位点进行线性化，并在插入片段PCR引物的5’端引入与载体克隆位点两端完全一致的15~25 bp同源序列（图1，图3）。将上述线性化的克隆载体和带有同源序列的PCR片段按合适比例混合，并加入HB-infusionTM Master mix，通过反应体系中DNA外切酶、DNA聚合酶以及连接酶的在50℃反应20 min即可快速完成定向克隆，阳性率几近100%。
图1. HB-infusionTM快速克隆试剂盒原理示意图。1. 线性化目的载体（左上）；2. PCR获取目的片段。设计的引物５’需要和线性化载体末端有15~25 bp的重叠（图中蓝色和黄色片段，细节可参考图3）；3. 按照一定比例把二者混合在HB-infusionTM的2´预混液内，50°C反应20 min后直接转化E.coli即可。
二、HB-infusionTM试剂盒的优点
1. 相比于传统的同源重组的无缝克隆方法进行，HB-infusionTM 试剂盒更高效，操作更简单，只需要一次反应即可完成定向克隆；
2. 对酶切位点无要求，可以把目的片段插入到任意载体的任意位点；
3. 连接片段之间不会引入任何其他序列；
4. 可以同时克隆多个片段。
三、产品包装
产品组成：
| 产品组成 | 使用次数 | 体积 |
| 2 x HB-infusionTM Master mix | 20 tests | 200 ul |
| Positive linearized pUC vector （250 ng） | 5 tests | 25 ul |
| Positive control insert (500 ng) | 5 tests | 25 ul |
| 储存条件 | -20 ℃ | |
汉恒生物提供的试剂试用装有：
| 试剂名称 | 中文名称 | 货号 | 试用规格 |
| SaveIt | 抗支原体试剂 | HB-SV-50 | 50 uL |
| CleanIt | 黑胶虫清除试剂 | HB-CI-50 | 50 uL |
| LipoFiter | 转染试剂 | HB-LF-50 | 50 uL |
| LipoFiter 3.0 | 高效转染试剂 | HB-LF3-50 | 50 uL |
| RNAFit | RNA转染试剂 | HB-RF-50 | 50 uL |
| LentiFit | 慢病毒包装专用转染试剂 | HB-LLF-50 | 50 uL |
| cck-8 | 细胞增殖检测试剂盒 | HB-CCK-8-50T | 50 T |
| HB-infusion | 无缝克隆试剂盒 | HB-infusion-5T | 5 T |
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文献和实验； ②Qubit 准确度更高：蛋白质、游离核苷酸、EDTA 等物质在 260nm 处也存在吸收峰，从而影响紫外分光光度计定量的准确度，而荧光染料仅与目标核酸特异性结合，不受其他杂质影响，qubit 成为精准定量的 「金标准」； ③Qubit 检测范围更精准：紫外分光光度计检测范围较宽（通常 ng/μL-μg/μL），但低浓度（ ④紫外分光光度计操作更简单，成本更低：紫外分光光度计可以直接点样进行定量，无需专业试剂；而 Qubit 法需经加染料、孵育等步骤，再用仪器检测，依赖于专门的染料，仪器价格更贵
温度越高，所得产物的特异性越高。有些反应甚至可将退火与延伸两步合并，只用两种温度(例如用60℃和94℃)完成整个扩增循环， 既省时间又提高了特异性。退火一般仅需数秒钟即可完成，反应中所需时间主要是为使整个反应体系达到合适的温度。 三、延伸：延伸反应通常为72℃，接近于Taq DNA 聚合酶的最适反应温度75℃。实际上，引物延伸在退火时即已开始，因为Taq DNA 聚合酶的作用温度范围可从20℃-85℃。延伸反应时间的长短取决于目的序列的长度和浓度。在一般反应体系中，Taq DNA聚合酶每分钟约可合成1kb
dsDNA抗体的诊断特异性为95%，敏感性为70%，且抗dsDNA抗体的产生常提示有肾脏损害，因此，抗dsDNA抗体常被作为SLE的活动指标，用于监测SLE病情变化，疾病活动期判断及药物治疗效果观察等。 目前市场上已有多种检测抗ds-DNA抗体的商品试剂盒，如短膜虫间接免疫荧光法(CL-IIF) 、免疫印迹法、胶体金斑点法、Farr 放射免疫测定法和酶联免疫吸附法等，鉴于免疫印迹法，胶体金斑点法仅用作阴阳性判断，而无法监测双链DNA抗体的浓度变化，而放射免疫测定法由于其潜在危害性临床较少使用
